OSKM-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
OSKM-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
OSKM-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】培养条件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
OSKM-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
OSKM-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
人骨髓浆细胞瘤株 AMO-1 6 33-1 DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮
人**内膜腺癌细胞 AN3CA 6 21-1&5-3 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠巨噬细胞 Ana-1 7 14-3 & 16-2 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
大鼠胰腺外分泌细胞 AR42J 14 2-2 & 18-4&35-3&35-4 F12K+20%FBS 贴壁
人视网膜上皮细胞 ARPE-19 8 9-4 & 15-2 & 23-2&18-5 D/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠胚胎瘤细胞 ATDC5 0 90%DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 污染
大鼠主动脉平滑肌细胞 ATR5 4 12-3 D/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胃癌细胞 AZ-521 8 29-1 1640+10%FBS 贴壁
小鼠黑色素瘤细胞 B16 7 11-1 & 11-3 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠黑色素瘤细胞 B16BL6 9 22-4&22-5 1640+10%小牛血清 贴壁
小鼠黑色素瘤细胞 B16-F10 7 10-3 & 17-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
EBV 转化的绒猴白细胞 B95-8 12 1-5&18-3 1640+10%FBS 贴壁
小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31 12 13-2 & 14-1 &4-5 DMEM+10%FBS 80%密度时1:2传代,生长慢,传代密度要大
小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31 5 7-5 DMEM+10%FBS 80%密度时1:3传代,生长慢,传代密度要大 状态OK
小鼠原B细胞株 BAF3 23 15-3 & 16-2 & 26-3 & 28-5&34-2 1640+10FBS加10ng/ml IL-3 悬浮
人膀胱移行细胞癌 BC-3C 8 9-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人乳腺癌细胞 Bcap-37 5 9-1 1640+10%FBS+1%P/S