Capan-2【人胰腺癌细胞】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
Capan-2【人胰腺癌细胞】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
Capan-2【人胰腺癌细胞】培养条件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
Capan-2【人胰腺癌细胞】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
Capan-2【人胰腺癌细胞】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
人支气管上皮样细胞 BEAS-2B 11 18-3 &32-3&33-3 上皮+5%FBS+1%上皮因子+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞 Bel-7402 11 6-4 & 28-4 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞 Bel-7404 32 1-4 & 2-1 & 6-3 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞 Bel-7405 7 2-1 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株 Bel/Fu 7 15-3 1640+10%FBS加20ug/ml 5-Fluoroural 贴壁
小鼠脑微血管内皮细胞株 Bend.3 5 27-4&22-5 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠胰腺癌beta细胞 BETA-TC-6 19 16-4 & 17-4&33-5&34-3 DMEM+15%FBS+1%P/S 贴壁
人胃腺癌细胞(低分化) BGC-823 5 12-2 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
幼仓鼠肾细胞 BHK-21 8 19-2 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人皮肤成纤维细胞 BJ 2 24-5 EMEM+10%FBS 贴壁
大鼠肝细胞 BRL-3A 7 24-3 MEM+10%FBS 贴壁
人乳腺癌细胞 BT-20 4 10-3 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人乳腺癌细胞 BT474 7 2-2 &5-4 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人乳腺癌细胞 BT-549 5 4-4 1640+0.023U/ml胰岛素+10%FBS 贴壁
小鼠小胶质细胞 BV2 6 18-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胰腺腺癌细胞 Bxpc-3 8 31-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠成肌细胞 C2C12 5 23-2 90%DMEM+10%FBS+1%P/S