DHBE【人支气管上皮病变细胞】发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约1×106/T25细胞培养瓶;传代次数4代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
DHBE【人支气管上皮病变细胞】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
DHBE【人支气管上皮病变细胞】培养条件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
收到细胞后如何操作:
首先,观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与我司联系。
用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于细胞培养箱内静置培养,隔天再取出进行观察。仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
确认细胞状态良好后,应及时将细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失。
建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术支持沟通交流。
预防细胞污染的注意事项:
1.实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风机运转5-10min再开始实验操作。
2.实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于空气的流通;实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。
3.每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。
4.操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。
5.CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁**。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,*后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。
6.定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
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