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收到THLE-3人肝永生化细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
THLE-3人肝永生化细胞细胞描述
THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)细胞系是正常肝细胞用SV40大T抗原转染得到。 将含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中生产病毒。 THLE-2 and THLE-3表达正常**肝上皮细胞特征性的表型。 当注射到无胸腺裸鼠中时，它们不成瘤，具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3将benzo[a]pyrene, N-nitrosodimethylamine, 和 aflatoxin B1代谢成附着于DNA的*终成瘤代谢物，从而揭示细胞色素P450途径的发挥作用。 THLE也保留了其他与化学致瘤物代谢相关的酶，比如epoxide hydrolase, NADPH cytochrome P450 reductase, superoxide dismutase, catalase, glutathione S-transferases, and glutathione peroxidase 这些永生化人肝细胞构成了研究**毒理学和人肝细胞癌的病原学及病理的体外模型。 1993年一月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代用去支原体试剂进行处理21天。 处理后六周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。
动物种别
人
性别
***
组织来源
器官： 肝组织： 左叶细胞类型： 用SV40大T抗原进行上皮永生化
形态
上皮细胞
培养基和添加剂
订购此细胞需提供100ml培养基。Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培养基(目录号CC3170)。 套装包含了500毫升基本培养基及分别冻存的添加剂，我们不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine和10%胎牛血清。温度： 37摄氏度。
供应限制
A。仅供研究之用。
THLE-3人肝永生化细胞传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，THLE-3人肝永生化细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次。
。
注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法： 冻存液：基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存：液氮储存
THLE-3人肝永生化细胞其它细胞系展示表：
yb-hxbz-213 SV40永生化的人胚肾上皮细胞 293T 规格25毫升/株.
yb-hxbz-214 SV40T转化的人胚肾细胞（亚系） 293T/17 规格25毫升/株.
yb-hxbz-215 人类胚胎肾脏表皮细胞 H293T 规格25毫升/株.
yb-hxbz-216 人胚肾细胞（亚系克隆） FIP293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-217 稳定表达EBNA1的人胚肾细胞 293E 规格25毫升/株.
yb-hxbz-218 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞 293ET 规格25毫升/株.
yb-hxbz-219 人胚肾细胞 AD293 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-220 Ad5DNA转化的胚肾 HEK-293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-221 人原胚肾转化细胞系 293 Ad5+ 规格25毫升/株.
yb-hxbz-222 表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞 293FT 规格25毫升/株.
yb-hxbz-223 人人胚肾细胞 AAV-293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-224 人胚肾上皮包装细胞 GP2-293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-225 人胚肾上皮包装细胞 GP2-293Luc 规格25毫升/株.
yb-hxbz-226 人肾上腺腺瘤细胞 NCI-H205 规格25毫升/株.
yb-hxbz-227 人胚肾上皮细胞 HK-2C 规格25毫升/株.
yb-hxbz-228 人肾癌细胞 KC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-229 人胚肾上皮细胞 HKC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-230 人肾小管近段上皮细胞 HK-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-231 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS 规格25毫升/株.
yb-hxbz-232 人胚肾细胞 2V6.11 规格25毫升/株.
yb-hxbz-233 人胚肾二倍体细胞 CCC-HEK-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-234 人肾癌细胞系(769-P) 769-P 规格25毫升/株.
yb-hxbz-235 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 Caki-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-236 人肾上腺皮质腺癌细胞 SW-13 规格25毫升/株.
yb-hxbz-237 人肾癌细胞系 A498 规格25毫升/株.
yb-hxbz-238 人肾癌细胞系 ACHN 规格25毫升/株.
yb-hxbz-239 人肾癌细胞 GRC-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-240 人肾上皮细胞 GES 规格25毫升/株.
yb-hxbz-241 人肾癌Wilms细胞 G401 规格25毫升/株.
