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收到人肠平滑肌细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人肠平滑肌细胞人肠平滑肌细胞说明:
平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。尽管关于兴奋收缩耦联还有许多生化机制并不清楚,但我们知道细胞内Ca2+是耦联的重要组成部分。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。研究表明人肠平滑肌细胞在IL-1beta and TNF-alpha的刺激下分泌IL-6,IL-6能显著的诱发全身的炎症反应。利用人肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
人肠平滑肌细胞(HISMC)提取于人肠组织,原代冻存。每管含有细胞数>5×105cells/ml,此细胞通过对actin 和desmin**荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。细胞可以达到15倍增。
推荐培养基: (SMCM, Cat. No. 1101)
产品使用说明
仅供科研研究使用,禁止用于人或动物的体外诊断。
Reference
[1]. Blennerhassett, M. G., Bovell, F. M., Lourenssen, S., McHugh, K. M. (1999) Characteristics of inflammation-induced hypertrophy of rat intestinal smooth muscle cell. Dig Dis Sci. 44(7):1265-72.
[2]. Ng, E. K., Panesar, N., Longo, W. E., Shapiro, M. J., Kaminski, D. L., Tolman, K. C., Mazuski, J. E. (2003) Human intestinal smooth muscle cells are potent producers of IL-6. Mediators Inflamm. 12(1):3-8.
人肠平滑肌细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人肠平滑肌细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人肠平滑肌细胞其它细胞系展示表:
NCI-H446 小细胞肺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Dami 巨核细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
SPC-A-1 肺腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
CHMas 肥大细胞白血病 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
SGC-7901 胃腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HEL 红细胞白血病 (Erythroleukemia) 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
BGC-823 低分化胃腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HL-60 原髓细胞白血病 (Promyelocytic lenukemia) 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
LoVo 结肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hut-78 皮肤T细胞**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Ls-174-T 结肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hut-102 皮肤T细胞**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCT-8 回盲肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Namalwa Burkitt`s**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCe-8693 盲肠未分化腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Jurknt. ybone E6-1 白血病细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HR-8348 直肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
THP-1 单核细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
BEL-7402 肝癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
U937 组织细胞**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
BEL-7404 肝癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Raji Burkitt's**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
BEL-7405 肝癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
MEG-01 成巨核细胞白血病 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HepG2 肝细胞癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
L129 NCTC克隆929 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
L-M TK 鼠胸腺激酶缺陷细胞株 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
STO 鼠胚成纤维细胞系 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周