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收到人绒毛膜滋养层细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人绒毛膜滋养层细胞胚胎滋养层是早期胚泡的外层遮盖物,并做为母亲**内膜和发育中胚胎之间的营养通路。紧贴在**壁的滋养层是胚胎着床必不可少的步骤,随后形成胎盘。覆盖着胎盘绒毛的人绒毛膜滋养层细胞提供母亲循环中氧和营养物质交换的介面。它们合成和释放绒毛膜促性腺**,胎盘催乳**和血管生成素,表达CXCR4, CCR5和泌乳刺**基因家族。在绒毛锚定位点,它们分化成侵袭型并表达CCR1。绒毛膜滋养层细胞的特性及近期发现的滋养层干细胞,使它们成为一个研究细胞分化和器官形成的理想的遗传学平台。
人绒毛膜滋养层细胞(HVT)提取于人胚胎绒毛膜滋养层组织,原代冻存。每管含有细胞数>1×106cells/ml,此细胞通过对alpha-和beta- HCG**荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。
推荐培养基(TM, Cat. No. 7121)
Reference
[1] Pavlov, N., Hatzi, E., Bassagliam Y., Frendo, J. L., Brion, D. E., Badet, J. (2003) Angiogenin distribution in human term placenta, and expression by cultured trophoblastic cells. Angiogenesis. 6(4):317-30.
[2] Maldonado-Estrada, J., Menu, E., Roques, P., Vaslin, B., Dautry-Varsat, A., Barre-Sinoussi, F., Chaouat, G. (2003) Predominant intracellular expression of CXCR4 and CCR5 in purified primary trophoblast cells from first trimester and term human placentae. Am J Reprod Immunol. 50(4):291-301.
[3] Wiemers, D. O., Ain, R., Ohboshi, S., Soares, M. J. (2003) Migratory trophoblast cells express a newly identified member of the prolactin gene family. J Endocrinol. 179(3):335-46.
[4] Sato, Y., Higuchi, T., Yoshioka, S., Tatsumi, K., Fujiwara, H., Fujii, S. (2003) Trophoblasts acquire a chemokine receptor, CCR1, as they differentiate towards invasive phenotype. Development. 130(22):5519-32.
人绒毛膜滋养层细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人绒毛膜滋养层细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人绒毛膜滋养层细胞其它细胞系展示表:
yb1071 人真皮成纤维母细胞-** 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1072 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1073 人脂肪细胞-内脏 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1074 人脂肪细胞-皮下 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1075 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1076 人角膜上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1077 人角膜细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1078 人视网膜内皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1079 人视网膜色素上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1080 人晶状体上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1081 人虹膜色素上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1082 人结膜成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1083 人非色素睫状上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1084 人小梁网细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1085 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1086 人膀胱平滑肌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1087 人尿道上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1088 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1089 人羊膜上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1090 人绒毛膜滋养层细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1091 人绒毛间叶成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1092 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1093 人**内皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1094 人**成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1095 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1096 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1097 人颅骨成骨细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周