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收到人脐动脉内皮细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人脐动脉内皮细胞血管内皮细胞对维持血管动态平衡起着重要作用。它们合成、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子。内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。这些过程都可以用培养的细胞进行体外研究,人脐静脉和动脉内皮细胞是这类研究中*常用的细胞类型。除了普通的内皮细胞特征例如“鹅卵石状”,VIII因子阳性着色,能摄取乙酰基化低密度脂蛋白,人脐血管内皮细CD31染色阳性。用IL-1或TNF-α预先处理过的细胞也能选择性地表达E-selectin和VCAM。
人脐动脉内皮细胞(HUAEC)提取于人脐带动脉组织,原代冻存。每管含有细胞数>5×105 cells/ml,此细胞通过vWF/Factor VIII 和CD31 (P-CAM)**荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。细胞可以达到15倍增。
推荐培养基
推荐使用内皮细胞培养基(Cat.No.1001)。
产品使用说明
仅供科研研究使用,禁止用于人或动物的体外诊断。
参考文献
[1] Morgan, D. M. L. (1996) Isolation and culture of human umbilical vein endothelial cells. In Human Cell Culture Protocols (Gareth E. Jones, eds.) Humana Press, Totowa, New Jersey, pp.104-109.
[2] Newman, P. J. et al., (1990) PECAM-1 (CD31) cloning and relation to adhesion molecules of the immunoglobulin gene superfamily. Science 247:1219-1222.
[3] Bevilaqua, M. P. et al., (1989) Endothelial leukocyte adhesion molecule 1: an inducible receptor for neutrophils related to complement regulatory proteins and lectins. Science 243:1160-1165.
[4] Osborn, L. et al., (1989) Direct cloning of vascular cell adhesion molecule 1, a cytokine induced endothelial protein that binds to lymphocytes. Cell 59:1203-1211.
人脐动脉内皮细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人脐动脉内皮细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人脐动脉内皮细胞其它细胞系展示表:yb-5900. NCI-H1869 [H1869](人肺癌细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-59. SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-12557. 7F2(小鼠杂交瘤细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-173. 3T3-L1(小鼠脂肪细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-11233. THLE-3(人肝上皮细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-12284. PT67(小鼠逆转录病毒包装细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-11372. hFOB 1.19(人SV40转染成骨细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-1777. HIT-T15(仓鼠beta胰岛细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-11506. Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-1550. Ca Ski(人小肠颈部表皮样癌细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-2196. GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-249. NCL-H548(人胰腺癌细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-138. Hs 683(人脑视神经胶质瘤细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-7002. Hs 1.Tes(正常人睾丸细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb-7131. Hs 181.Tes(正常人睾丸细胞). 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
24858. Y567 [VTT C-79094]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
24683. [X464-20C]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
26292. NCYC 234 [IPAZSC 148]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
26785. Y-99. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
55669. STJ.EPI.H7. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
15834. [CIP 104786]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
11325. [CIP 104328; IAM 13570; ICMP 5794; NCPPB 2991]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
25818. ICPB TR7 [C-1; ICMP 8639; NCPPB 2626]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
43056. R1000. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周