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收到大鼠**成纤维细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
大鼠**成纤维细胞成纤维细胞是胚胎中胚层起源的间叶细胞。它们被广泛地用于细胞和分子方面的研究。这主要是因为纤维原细胞是体外培养中*容易生长的一类细胞,它们的耐久力使它们能够用于基因转染、显微注射等多种操作。有确凿的证据表明,在身体不同的部分的成纤维细胞有显著的不同。组织中的成纤维细胞暴露在动态的机械环境中将影响健康的和正在**的软组织的结构完整性。纤维原细胞分泌富含I和,或III型胶原的细胞外基质。另外,有报道指出在**增生**中脾脏成纤维细胞大量增长。
大鼠**成纤维细胞(Rat Lymphatic Fibroblasts)提取于大鼠**节,原代冻存。每管含细胞数>5×105cells/ml,此细胞通过对Fibronectin的**荧光染色验证,经测试不含有支原体、**、酵母和**。
推荐培养基:(MM, Cat. No. 1901)
Reference
[1] Conrad, G. W., Hart, G. W., Chen, Y. (1977) Differences in vitrobetween fibroblast-like cells from cornea, heart, and skin of embryonicchicks. J. Cell Sci. 26:119-137.
[2] Gabbiani, G., Rungger-Brandle, E., The fibroblast. In Tissue Repairand Regeneration (L. E. Glynn, ed.), pp 1-50. Handbook of Inflammation,Vol. 3. Amsterdam, Elsevier, 1981.
[3] Domracheva, E. V., Rogova, E. M., Vorob'ev, A. L. (1984) Monolayerculture of bone marrow and splenic fibroblasts in lymphoproliferativediseases. Ter Avkh. 56:63-65.
大鼠**成纤维细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,大鼠**成纤维细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
大鼠**成纤维细胞其它细胞系展示表:
yb1565 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 25 ml
yb1566 T/E 胰酶/EDTA消化液 Trypsin/EDTA solution 100 ml
yb1567 TNS 胰酶中和液 Trypsin Neutralization Solution 100 ml
yb1568 TNS-sf 胰酶中和液-无血清 TNS-sf (Trypsin Neutralization Solution-serum free) 100 ml
yb1569 ECDS 非酶细胞裂解液 Enzyme-Free Cell Dissociation Solution 100 ml
yb1570 CFM 细胞冻存液 Cell Freezing Medium 50 ml
yb1571 SF-CFM 无血清细胞冻存液 Serum-Free Cell Freezing Medium 50 ml
yb1572 StemCryo 人胚胎干细胞冻存液 Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium 50ml
yb1573 StemCryo 人胚胎干细胞冻存液 Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium, 5 x 10mL
yb1574 TB 台盼蓝 Trypan Blue, 0.4% 50 ml
yb1575 DPBS 磷酸盐缓冲液 Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline 500 ml
yb1576 HBSS 平衡盐溶液 Hank's Balanced Salt Solution 500 ml
yb1577 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml 1 ml
yb1578 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml 1 ml
yb1579 GSN 0.2%的明胶溶液 0.2% Gelatin Solution 100ml
yb1580 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 500 ml
yb1581 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 5 ml
yb1582 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 100 ml
yb1583 AMS 抗**溶液 Antimycotic Solution 50 ml
yb1584 ABAMS **/抗霉菌溶液 Antibiotic/Antimycotic Solution 50 ml
yb1585 CCGW 细胞培养超纯水 Cell Culture Grade Water 500 ml
yb1586 MDS 肌细胞分离液 Myocyte Detachment Solution 100 ml
yb1587 BPE 牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract 25 mg