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哺乳动物双杂交试剂盒
产品及特点
双杂交系统是在体内检测蛋白-蛋白相互作用的极强有力方法。双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains): 一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA序列,和一个转录激活域,这个转录激活域与基础转录机制相作用。一个转录激活域联合一个DNA结合域可能在TATA盒启动RNA聚合酶II复合体的装配,同时增强转录。在本哺乳动物双杂交系统中,DNA结合域和转录激活域分别由不同质粒产生,融合于DNA结合域的一个蛋白质(“X”)与融合于转录激活域的**个蛋白质(“Y”)相互作用时,DNA结合域就与转录激活域紧密关联。在这个系统中,蛋白X与Y的相互作用导致报告基因的转录。蛋白相互作用正对照反应的概略图如下:
哺乳动物双杂交试剂盒如图:在正对照反应中,pBIND-Id和pACT-MyoD对照载体与pG5 luc载体一起共同转染哺乳动物细胞。载体pG5luc的萤火虫萤光素酶基因上游含有在基本TATA盒上游的5个GAL4结合位点。细胞温育2-3天,裂解,然后用双荧光素酶活性检测试剂盒检测萤火虫和海肾萤光素酶。在正对照实验中,在GAL-4Id和 VP16-MyoD上融合的蛋白Id和MyoD之间的相作用导致载体pG5 luc上的萤光素酶的高水平表达。
哺乳动物双杂交试剂盒本产品具有下列特点:
1. 用户可在所选哺乳动物细胞系中研究蛋白质的相互作用,使蛋白质更可能处于其本来构型,从而使目的蛋白更好地保持了诸如糖基化、磷酸化和酰基化等翻译后的修饰。
2. 易于定量:可使用天恩泽双荧光素酶活性检测试剂盒(产品编号:130595)快捷检测萤火虫和海肾萤光素酶。
3. 快速瞬时检测:转染后两天即可得到结果,而酵母系统则需3-4天。
4. 稳定转染:pACT载体含有新霉素磷酸转移酶基因,可用于稳定转染的选择。
使用及效果
详细使用步骤请参见产品使用手册。
哺乳动物双杂交试剂盒90705-50 柱式土壤RNAout 50次 1590
80804-50 柱式**RNAout 50次 990
51102-100 **RNAout(G-用) 100次 390
51102-250 **RNAout(G+/G-通用) 250次 790
130844-50 柱式分支杆菌RNAout 50次 1490
3073-50 一管式病毒RNAout 50次 790
71001-50 柱式病毒RNAout 50次 990
3090-100 固相RNase**剂 100 mL 450
90904-50 膜结合DNA**试剂盒 50次 490
81027-50 TRIzol伴侣 50次 390
3660-100/250 非冻型组织DNA保存液 100 mL/250ml 490/990
60910-100/250 非冻型血液DNA保存液 100 mL/250ml 490/990
90315-15/100 非冻型尿液DNA保存液 15 mL/100ml 120/490
91103-100 非冻型拭子病毒保存液 100 mL 390
80802A-100 非冻型拭子DNA保存液A(无拭子) 100 mL 390
80802B-100 非冻型拭子DNA保存液B(有拭子) 100 mL 490
70603-100 土壤腐殖酸**剂 100 mL 490
70302-100 一步离心式石蜡**剂 100次 290
90901-200 菌体内****剂 200 mL 240
101118-100 病毒沉淀剂 100 mL 690
动物总DNA提取
71206-50 柱式动物DNAout 50次 490
81101-50 柱式昆虫DNAout 50次 690
60306-50 柱式血液DNAout 50次 490
80805-50 柱式毛发DNAout 50次 790