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热敏磷酸酶
产品及特点
本产品是从南极微生物中克隆并在大肠杆菌中表达的热敏磷酸酶,它能催化除去 DNA 或 RNA 末端的5′磷酸基团。由于磷酸酶处理后的 DNA 片段缺少连接酶所要求的5′磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
热敏磷酸酶具体有下列特点:
1. 除去 DNA、RNA、rNTPs 和 dNTPs 5' 末端的磷酸基团
2. 防止克隆载体的自连接
3. 蛋白质丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的去磷酸化
4. 为 5' 末端标记准备模板
5. 去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
6. 65℃ 加热 5 分钟可使酶完全失活
热敏磷酸酶活性单位定义
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使1 μg 经 HindIII (产生 5' 突出末端) 、EcoRV (产生平齐末端) 或 PstI (产生 5' 凹陷末端) 消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化 (通过转化 E. coli 细胞来检测) 。
反应条件
1× 热敏磷酸酶反应缓冲液 [50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2 (pH 6.0 @25℃)]。37℃ 温育。
热失活
65℃ 5分钟。
参考文献
(1) Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning:
A Laboratory Manual, (2nd ed.), (p. 5.72). Cold Spring Harbor: Cold
Spring Harbor Laboratory Press.
(2) Rina, M. et al. (2000) Eur. J. Biochem., 267, 1230–1238.
(3) Guthrie, E., unpublished observations.
热敏磷酸酶YB038 汉坦病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB039 水痘-带状疱疹病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB040 人类小DNA病毒(B19)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB041 麻疹病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB042 风疹病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB043 新布尼亚病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB044 麻疹病毒/风疹病毒核酸荧光PCR试剂盒 48
YB045 东部/西部/委内瑞拉马脑炎病毒核酸三色荧光PCR检测试剂盒 48
YB046 登革热Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒核酸四色荧光PCR检测试剂盒 48
YB047 小反刍兽疫病毒荧光PCR检测试剂盒 48
编号 名称 规格
YB001 脑膜炎奈瑟菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB002 猪链球菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB003 产单核李斯特菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB004 猪链球菌/脑膜炎奈瑟菌双色核酸荧光PCR检测试剂盒 48
YB021 阪崎肠杆菌荧PCR试剂盒 40次/盒
YB022 沙门氏菌属荧PCR检测试剂盒 40次/盒
YB023 志贺氏菌PCR试剂盒 40次/盒
YB024 单增李斯特氏PCR试剂盒 40次/盒
YB025 金黄色葡萄球PCR试剂盒 40次/盒
YB026 霍乱弧PCR试剂盒 40次/盒
YB027 副溶血弧PCR试剂盒 40次/盒
YB028 大肠埃希O157:H7PCR试剂盒 40次/盒
YB029 产毒副溶血弧PCR试剂盒 40次/盒
YB031 空肠弯曲菌荧PCR检测试剂盒 40次/盒
YB032 蜡样芽孢杆PCR试剂盒 40次/盒
YB033 副伤寒杆PCR试剂盒 40次/盒
YB034 伤寒杆PCR试剂盒 40次/盒
YB035 炭疽杆PCR试剂盒(分别有检Capa/Rob/PAG的试剂盒) 40次/盒
YB036 猪链球菌荧PCR试剂盒 40次/盒