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  • 产品名称:微球菌核酸酶

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简单介绍:
微球菌核酸酶是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。微球菌核酸酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在
详情介绍:

微球菌核酸酶

产品及特点
Micrococcal Nuclease(微球菌核酸酶)是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。 本酶主要用作:
1. 细胞粗抽提液中核酸的水解。
2. 为制备核小体(Nucleosome)时消化分解染色质(Chromatin)。


微球菌核酸酶纯度
1. 50 U的本酶和1 μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. SDS-PAGE: >95%。
使用及效果
DNA的片段化
3. 在微量离心管中配制下列反应液。
DNA 100 μg10×Buffer 5 μlMicrococcal Nuclease 2UdH2O up to 50 μl
4. 37℃反应数分钟(通过预实验确定具体反应时间)。
5. 加入5 μl的 200 mM EGTA(或 EDTA)停止反应。
6. 加入5 μl(1/10量)的 3 M NaOAC(pH5.2)。
7. 加入125 μl( 2.5倍量)的冷无水乙醇,-20℃放置30~60分钟。
8. 离心回收沉淀,用70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
微球菌核酸酶备注
本酶的活性严格依赖于Ca2+的存在,用EDTA或EGTA可以终止反应。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) ,是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到,可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内,微球菌核酸酶均有活性,无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物,其*适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA 和 RNA底物产生带有 3' 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
微球菌核酸酶YB2401 UltraECL底物化学发光检测试剂盒 50ml(A液B液各25ml)/100ml(A液B液各50ml)/500ml(A液B液各250ml)
YB2501 碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT) 100ml
YB0101 GenFectinTM基因转染试剂 0.5ml(可做250次6孔板或者35mm平皿转染)/1ml(可做250次6孔板或者35mm平皿转染)
RNA纯化
YB3060 非冻型组织RNA保存液 100mL|250mL
YB111202 非冻型血液RNA保存液 10mL|100mL
YB80601 非冻型**RNA保存液 100mL|250mL
YB91103 非冻型拭子病毒保存液 100mL
YB110810 病毒沉淀剂 100mL
YB101118 水样病毒沉淀剂 10次
YB3070 动物RNAOUT 100mL|250mL
YB71201 柱式动物RNAOUT 50次|250次
YB80901 大提柱式动物RNAOUT 5次
YB3071 血液RNAOUT 50次|250次
YB71202 柱式血液RNAOUT 50次
YB80902 大提柱式血液RNAOUT 5次
YB80929 液体样品RNAOUT 50次|250次
YB70401 软骨RNAOUT 50次
YB101121 柱式软骨RNAOUT 50次
YB81102 石蜡包埋组织RNAOUT 30次
YB81220 柱式昆虫RNAOUT 50次
YB101113 柱式软体动物RNAOUT 50次
YB101109 柱式粪便RNAOUT 50次
YB130829 细胞蛋白质-RNA双提取试剂盒 50次
YB3080 植物RNAOUT 50次|250次
YB71203 柱式植物RNAOUT 50次
YB90404 柱式植物RNAOUT 2.0 50次
YB80903 大提柱式植物RNAOUT 5次
YB120503 柱式藻类RNAOUT 50次

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