产品名称：新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)

新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)实验的建立步骤

1、样品准备区　　这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：　　1)PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。　　2)组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。　　3)用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。　　4)DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作，以防止在吸取样品时有气溶胶**。　　5)大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。　　6)管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生，而且管子不能用力崩开，这样会产生气溶胶。　　7)任何时候都应该穿实验服和带手套，手套要经常更换，尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间，经常清洗。

2、新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)样品准备和RNA-PCR　　RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。

3、前PCR区　　必须有专门用于准备各种反应的区域，这个区域必须保持干净，而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备，特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。

4、新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)实验室试剂的操作 1)所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。　　2)所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压**。　　3)在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。　　4)所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。　　5)所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性**的瓶子和管子。　　6)新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。　　7)样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。

5、新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)在前PCR区建立PCR混合物　　1)可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃，在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。　　2)如果你的实验室使用多套引物，以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济，可以考虑分装保存够**的PCR成分。　　3)作为一个规则，应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且，你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。　　4)阴性样品要与每组样品同时做，以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染，阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。　　5)当做阳性对照时，有两个理由决定了应该使用*少数量的核酸。　　6)由于必须有对照反应，对照模板的特点应该予以考虑。

6、新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒(PCR法)后PCR区　　PCR完成以后，需要分析样品并解释数据，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的，决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动。7、控制污染的方法　　已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG，这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线，这种方法不能完全消除污染问题，但可以将污染降低几个数量级。XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401热启动Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干扰Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50UXY130618T7 DNA 聚合酶(未修饰)300UXY130602Vent DNA 聚合酶100UXY131195Deep Vent DNA 聚合酶100UXY131182Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100UXY130612Bst DNA 聚合酶，全长500UXY100209Bst DNA聚合酶，大片段800UXY130616Bsu DNA 聚合酶，大片段200UXY1306139°Nm DNA聚合酶200UXY130614Therminator DNA 聚合酶200UXY131196Therminator II DNA 聚合酶100UXY130617Therminator γ DNA 聚合酶200UXY60905MMLV逆转录酶10000U|50000UXY131209MMLV逆转录酶(H-)1000UXY131210耐热型MMLV逆转录酶(H-)1000UXY90502AMV逆转录酶200UXY120312末端脱氧核苷转移酶500UXY120509Poly(A)聚合酶20UXY130620Poly(U)聚合酶60UXY131124多核苷酸磷酸化酶100mgXY120307SP6 RNA聚合酶1000U|5000UXY120310T7 RNA聚合酶1000U|25000UXY120309T3 RNA聚合酶1000U|10000UXY130641T4 核酸内切酶 V2000UXY130643烷基腺嘌呤DNA糖基化酶500UXY1306458-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶80UXY130646尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY130647尿嘧啶糖基化酶抑制剂200UXY130648Afu 尿嘧啶-DNA 糖基化酶200UXY130666尿嘧啶切刻酶50UXY130649人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY120505Dam 甲基转移酶500UXY120511CpG 甲基转移酶(M.SssI)100UXY130653GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)200UXY120506T4聚核苷酸激酶200UXY130655热敏磷酸酶500UXY130552碱性磷酸酶，偶联级500UXY131125辣根过氧化物酶，偶联级100mgXY120405碱性磷酸酶，大肠杆菌25UXY120404碱性磷酸酶，牛小肠500UXY120403虾碱性磷酸酶300UXY130657无机焦磷酸酶，热稳定250UXY130658无机焦磷酸酶 (酵母)10UXY130659三磷酸腺苷双磷酸酶10000milliUXY130660ATP硫酸化酶10UXY120419大肠杆菌DNA连接酶1000UXY60609T4 DNA连接酶200UXY130621Taq DNA 连接酶1000UXY1306249°N DNA 连接酶2500UXY120421T4 RNA连接酶1000UXY130622T4 RNA连接酶 11000UXY130855T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )150UXY130856T4 RNA 连接酶 2(截短型 )2000UXY130857T4 RNA 连接酶 2 (截短型 K227Q)2000UXY120510ATP依赖的Dnase200UXY131230DNase I干粉100mgXY130984DNase I溶液1.5mLXY90205RNase A干粉100mg|500mgXY3160RNase A溶液1.5mLXY120409BAL 31核酸酶50UXY101001Benzonase核酸酶500UXY130824冷启动核酸酶10000UXY120407S1核酸酶5000UXY120408绿豆核酸酶1000UXY120412微球菌核酸酶5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸内切酶 III500UXY130638核酸内切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸内切酶 IV500UXY130640核酸内切酶 V250UXY130639核酸内切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸内切酶 VIII1000UXY130635T7核酸内切酶 I250UXY130634人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓扑异构酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重组酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶，测序级25μgXY131026弹性蛋白酶5mgXY120508肠激酶(轻链)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183链激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜热菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶，质谱级100μgXY130868人二硫键异构酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-琼脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙酰化牛血清白蛋白400μLXY130874人玻连蛋白100μgXY130870硫氧还蛋白5mgXY131021链霉亲和素1mgXY130818HRP标记链霉亲和素0.1mLXY131022碱性磷酸酶标记链霉亲和素0.5mLXY131085亲和素10mgXY131086HRP标记亲和素2mgXY131087碱性磷酸酶标记亲和素100mgXY131088荧光素(FITC)标记亲和素5mgXY131090中性亲和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093荧光素标记的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根过氧化物酶5mgXY131096生物素化的碱性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌体基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664极高热稳定单链结合蛋白50μg
核酸电泳及回收