产品名称：牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)

牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)实验的建立步骤

1、样品准备区　　这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：　　1)PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。　　2)组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。　　3)用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。　　4)DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作，以防止在吸取样品时有气溶胶**。　　5)大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。　　6)管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生，而且管子不能用力崩开，这样会产生气溶胶。　　7)任何时候都应该穿实验服和带手套，手套要经常更换，尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间，经常清洗。

2、牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)样品准备和RNA-PCR　　RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。

3、前PCR区　　必须有专门用于准备各种反应的区域，这个区域必须保持干净，而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备，特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。

4、牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)实验室试剂的操作 1)所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。　　2)所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压**。　　3)在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。　　4)所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。　　5)所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性**的瓶子和管子。　　6)新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。　　7)样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。

5、牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)在前PCR区建立PCR混合物　　1)可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃，在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。　　2)如果你的实验室使用多套引物，以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济，可以考虑分装保存够**的PCR成分。　　3)作为一个规则，应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且，你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。　　4)阴性样品要与每组样品同时做，以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染，阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。　　5)当做阳性对照时，有两个理由决定了应该使用*少数量的核酸。　　6)由于必须有对照反应，对照模板的特点应该予以考虑。

6、牛BGH基因核酸检测试剂盒(PCR法)后PCR区　　PCR完成以后，需要分析样品并解释数据，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的，决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动。7、控制污染的方法　　已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG，这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线，这种方法不能完全消除污染问题，但可以将污染降低几个数量级。XY80808蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制剂混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制剂混合液25mLXY130526**专用蛋白酶抑制剂10mLXY130527哺乳动物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130528植物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130529酵母专用蛋白酶抑制剂5mLXY130530His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mLXY130531组织培养专用蛋白酶抑制剂1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制剂溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液10mLXY100538钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液10mLXY100539胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130540二氯异香豆素溶液10mLXY130541E-64蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100837EDTA溶液,0.5M,蛋白级10mLXY130532EGTA溶液10mLXY130542水蛭素溶液2000ATUXY100836亮抑蛋白酶肽溶液1mLXY130533木瓜蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100835胃蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130545膦酰二肽溶液10mLXY100833PMSF溶液5mLXY131043CHAPS5gXY131044辛甲基β 葡糖苷1gXY131045辛甲基硫吡喃葡萄糖苷5gXY131046n-十二烷基-β-D-麦芽糖苷1gXY131047脱氧胆酸钠5gXY131048胆酸钠5gXY131049十二烷基磺酸钠100gXY131050去垢剂去除树脂10mLXY131051十二烷基磺酸钠**剂25mLXY131052β- 巯基乙醇，蛋白级10mLXY131053蛋白级DTT5gXY131054免称量蛋白级DTT48管XY131055TCEP 盐酸膦1gXY131056TCEP 溶液5mLXY131120盐酸胍溶液200mLXY131222咪唑溶液100mLXY131058咪唑25gXY131059亚氨二乙酸介质10mLXY131061谷胱甘肽S 转移酶1mgXY81216核酸**剂1.5mLXY81029非变性法蛋白沉淀试剂盒10次XY81217微量蛋白沉淀试剂盒50次XY61205血清白蛋白**剂15次XY100915SDS-PAGE预制胶12块XY80810一站式SDS-PAGE电泳套装30次XY100867SDS-PAGE浓缩胶配胶液500mLXY100868SDS-PAGE分离胶配胶液500mLXY81204SDS-PAGE上样液10mLXY81203SDS-PAGE电泳液5L|20LXY100908一站式长效期SDS-PAGE电泳套装30次(A)|30次(B)XY100909长效期SDS-PAGE配胶液200mLXY100910长效期SDS-PAGE还原剂10mLXY100911长效期SDS-PAGE上样液1mLXY100912长效期SDS-PAGE电泳液(干粉)20L(A)XY81205一站式Tricine-SDS-PAGE套装30次XY81225Tricine-SDS-PAGE配胶液250mL|1000mLXY81213Tricine-SDS-PAGE上样液1mL|5mLXY81214Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉)10L|50LXY81226Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液(干粉)10L|50LXY81212一站式蛋白非变性PAGE套装30次(A)|30次(B)|30次(C)XY100828高pH缓冲液套装30次XY100829中pH缓冲液套装30次XY100830低pH缓冲液套装30次XY70102蛋白质电泳分子量标准15次(A)|20次(B)|10次(C)XY70704预染蛋白质电泳分子量标准10次(A)|10次(B)XY90402蛋白胶微量回收试剂盒50次XY90403蛋白胶中量回收试剂盒5次XY80812考马斯亮蓝染液250mLXY61204一步式PAGE染液10次XY111203绿如蓝蛋白染液250次XY100810超快蛋白银染试剂盒1000mLXY100811质谱兼容型蛋白银染试剂盒10次XY100603银染**剂30次XY81215一站式Western印迹套装(显色法)20次(A)|20次(B)XY131104Western 封堵液500mLXY131105酪蛋白封堵液100mL(A)|100mL(B)XY131236牛血清白蛋白封堵液250mLXY131109Tris 缓冲盐溶液(TBS)10包XY131112氯萘酚溶液50mLXY131114ABTS 溶液50mlXY131115OPD 干粉25gXY131116pNPP 干粉1gXY131108ONPG 干粉1gXY101122尼龙膜1张XY101123PVDF膜1张XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924丽春红S染膜液250mLXY100928湿法电转液(干粉)20LXY81207半干法电转液(干粉)20LXY100878Western印迹膜封膜液100mLXY81208印迹膜抗体稀释液100mLXY80813Western印迹膜抗体**剂50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑蓝250mgXY81224BCIP/NBT显色试剂盒100mLXY100214预混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增强型DAB显色试剂盒100mLXY101106沉淀型TMB显色试剂盒100mLXY91101一管式 TMB 显色液100mL(A)XY120201超敏化学发光(HRP)检测试剂盒25mL|250mLXY131192超敏化学发光(AP)检测试剂盒25mLXY131142鲁米诺1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 稳定剂/ 稀释剂200mLXY130565β-Actin小鼠单抗30μLXY130566α-Actin小鼠单抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠单抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠单抗30μLXY130569GAPDH小鼠单抗30μLXY130570植物Actin小鼠单抗30μLXY130571组蛋白3.1小鼠单抗30μLXY130572COX IV兔单抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc)，碱性磷酸酶标记100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L)，碱性磷酸酶标记100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L)，碱性磷酸酶标记100μLXY131148驴抗山羊IgG，碱性磷酸酶标记60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记300μLXY131152兔抗鸡IgY，辣根过氧化物酶标记300μLXY131153驴抗山羊IgG，辣根过氧化物酶标记60μLXY131154山羊抗小鼠IgG，荧光素488标记0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG，荧光素555标记0.1mgXY131156山羊抗兔IgG，异硫氰酸荧光素标记0.1mgXY131157藻红蛋白标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131158荧光素488标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131159荧光素555标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131160异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG，藻红蛋白标记0.1mgXY100841β-巯基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,电泳级)100mLXY90311电泳级Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白样品处理试剂盒500次
工具酶