产品名称：营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)

营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)

(Nutrient Agar)

用 途：

营养琼脂用于**总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于**效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995，ISO标准)。

原 理：

蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

营养琼脂配方(每升)：

蛋白胨 10g

牛肉膏粉 3g

氯化钠 5g

琼脂 15g

*终pH 7.3±0.2

使用方法：

1、称取营养琼脂33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压**15min，备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL**生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100，1：1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于**平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的**平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法：

做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

7、菌落计数的报告：

选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计

A：稀释度的选择：

应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之(见附表)。

若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字(见表中例2及3)。

若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度*高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度*底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。

若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以*底稀释倍数报告之(见表中例6)。

若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以*接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。

菌落数的报告：

菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位数字后面的有效数值，以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数，也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。

稀释度选择及菌落数报告方式

稀释度选择及菌落数报告

质量控制：

本品接种下列菌株，置于36±1℃温箱中培养48±2h，结果如下：

营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)

贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规 格： 250g

缓冲蛋白胨水 CP0290 225mlX6瓶 用于沙门氏菌和阪崎肠杆菌的前增菌培养。
缓冲蛋白胨水 CP0560A 9mlX20支 用于食品中沙门氏菌、阪崎肠杆菌的前增菌培养。
大肠杆菌O157显色琼脂平板 YB007B 90mmX20个 用于分离和鉴别大肠杆菌O157（含添加剂）。
山梨醇麦康凯琼脂平板 CP0270 90mmX20个 用于致病性大肠杆菌(包括O157：H7）的分离培养。
改良EC肉汤（mEC+n） CP0260 225mlX6瓶 用于致病性大肠杆菌O157：H7的增菌培养。
MUG培养基 CP0900 5mlX20支 用于大肠埃希氏菌的快速测定，可观察荧光和吲哚试验。
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB） 022220A 10mlX20支 用于多管发酵法测定大肠菌群的确证试验。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST） 022210A 10mlX20支 用于多管发酵法测定大肠菌群和粪大肠菌群。
大肠菌群大肠杆菌显色琼脂平板 YB003A 90mmX20个 用于快速检测大肠菌群和大肠杆菌。
磷酸盐缓冲液 CP0511A 225mlX6瓶 用于样品的稀释。
双糖铁斜面 CP0190 20支/盒 用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖，及产生硫化氢的生化反应。
营养琼脂（斜面） CP0150 20支/盒 用于普通菌种的保存。
营养肉汤 22012 10mlX20支 用于一般**培养 、转种 、复壮 、增菌等，也可用于**效果测定。
沙氏琼脂平板 CP0170 90mmX20个 用于**的分离培养，还用于一次性使用卫生用品**菌落总数检测。
巧克力平板培养基（单抗） 029032A 90mmX20个 添加万古霉素，用于分离奈瑟氏菌 、流感嗜血菌等。
巧克力平板培养基（单抗） 029033A 70mmX20个 添加万古霉素，用于分离奈瑟氏菌 、流感嗜血菌等。
巧克力平板培养基（普通） 29032 90mmX20个 用于分离奈瑟氏菌 、流感嗜血菌等。
哥伦比亚血平板 CP0160 90mmX20个 用于一般病原菌的分离培养和溶血性**的鉴别。
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（MLST） 022212A 225ml/X10袋 添加万古霉素即为MLST,用于阪崎肠杆菌PCR检验方法选择性增菌。
7.5%氯化钠肉汤 CP0700 225ml/X10袋 用于金黄色葡萄球菌和其他耐盐菌的选择性增菌培养。
10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤 CP0690 225ml/X10袋 用于金黄色葡萄球菌的多管发酵法测定及增菌培养。
缓冲蛋白胨水 CP0680 225ml/X10袋 用于食品中沙门氏菌、阪崎肠杆菌的前增菌培养。