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结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)
(Violet Red Bile Agar-MUG)
用 途:
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008)
原 理:
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
培养基配方(每升):
蛋白胨 7.0g
酵母膏粉 3.0g
乳糖 10.0g
氯化钠 5.0g
3号胆盐 1.5g
中性红 0.03g
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG) 结晶紫 0.002g
琼脂 15.0g
MUG 0.1g
*终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、称取结晶紫中性红胆盐MUG琼脂41.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压**,备用。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择2~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基,琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。
3、36±1℃培养18—24h。
4、观察菌落形态,并于暗室中用360nm~360nm波长紫外灯照射,计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
质量控制:
质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下:
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:100g结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)
金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003 FSCC223005 支 阳性对照菌,微生物检测与质控菌种金黄色葡萄球菌 ATCC25923 FSCC223001 支 阳性对照菌,微生物检测与质控菌
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 FSCC223004 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
酿酒酵母 ATCC9763 FSCC214002 支 阳性对照菌,培养基质控用
肺炎克雷伯氏菌 CMCC(B)46117 FSCC167002 支 阳性对照菌,培养基质控菌
肺炎克雷伯氏菌 广临检-57 fSCC167001 支 阳性对照菌,微生物检测与质控菌株
阪崎肠杆菌ATCC29544 FSCC145010 支 阳性对照菌,微生物检测与质控
痢疾志贺氏菌CMCC(B)51105 FSCC219003 支 阳性对照菌,微生物检测与质控菌
宋内志贺氏菌CMCC(B)51592 FSCC219006 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
福氏志贺氏菌CMCC(B)51572 FSCC219005 支 阳性对照菌,微生物检测与质控菌
白色***CMCC(F)98001 FSCC129002 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
白色***ATCC10231 FSCC129001 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
绳状青霉GIM3.104 FSCC197002 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
桔青霉AS3.2788 FSCC197001 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
黑曲霉CMCC(F)98003 FSCC114002 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
黑曲霉ATCC16404 FSCC114001 支 阳性对照菌,微生物检测与质控用
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