产品名称：胰蛋白月示-亚硫酸盐-琼脂培养基

胰蛋白月示-亚硫酸盐-琼脂培养基

(Tryptose Sulfite Agar)

用 途：

用于城市供水中滤膜法测定亚硫酸盐还原***(梭状芽孢杆菌)孢子。(中华人民共和国城镇建设行业标准CJ/T 149—2001)

原 理：

胰蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵为硫化氢指示剂;梭状芽孢杆菌将焦亚硫酸钠还原为硫化氢，与铁离子结果形成黑色沉淀。

培养基配方(每升)：

胰蛋白月示 15g

大豆蛋白胨 5g

酵母膏粉 5g

焦亚硫酸钠(Na2S2O5) 1g

柠檬酸铁铵 1g

琼脂 15g

*终pH7.6±0.2

使用方法：

1、称取本品42g，加入1000 mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃**15分钟，待冷至50℃左右倾注平皿。

2、滤膜**

将滤膜放入烧杯中，置于沸水中煮沸**三次，每次15分钟。前两次煮沸后需要更换水洗涤2-3次，以除去残留溶剂。

3、滤器**

视滤器质地采用干热(酒精棉球火焰)或湿热**。

4、孢子的选择

水样在试验前须放置于水浴锅中，75±1℃加热15分钟。用同样的水样瓶作空白，用温度计检查加热温度。

5、接种与培养

水样的过滤量要适当：对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽孢杆菌轻度污染的水，取100mL过滤;对污染严重的水或废水，可用无菌水稀释后检测。调配一定的稀释度，使在滤膜上生长的黑色菌落分离，而更易于计数。

水样过滤后，用无菌镊子将滤膜过滤面朝下，置于培养皿中，同时使滤膜下无气泡。小心地将18mL约50℃的培养基倾注于培养皿中的膜上。在形成培养基层后，37±1℃培养20±4h和44±4h。如果使用厌氧培养箱，滤膜可放置在琼脂面上，且滤膜面向上。

6、观察结果。

培养20±4h和44±4h后，计数所有黑色菌落。

7、分析结果的表述

试验报告应说明所使用的方法，单位体积水样中亚硫酸盐还原厌氧**培养44±4h的孢子;孢子数太多，黑色菌落连在一起而难以计数，可采用20±4h培养时间的孢子大约数目。结果以CFU/100mL计。

质量控制：

质控菌株接种后于37±1℃培养24—48h，结果如下：

胰蛋白月示 -亚硫酸盐-琼脂培养基质量控制

贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规 格：250g

Lugol氏碘液 29120 10ml/支 用于淀粉水解试验。
无菌液体石蜡 29110 10ml/支 覆盖液体培养基用于厌氧培养。
40%无菌尿素溶液 29100 2mL/支×10/盒 每5支(即10mL)添加于200mL尿素琼脂培养基基础(023090)中。
多粘菌素B(氯化钠多粘菌素B肉汤配套试剂) SR0070 25000IU/支×10/盒 每支含多粘菌素B25000IU，添加于100mL(025081)中配成氯化钠多粘菌素B肉汤
四硫磺酸钠亮绿培养基配套试剂 SR0050 2×5支/盒 含碘液和煌绿，2支添加于100mL(023031)中配成TTB。
四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂 SR0040 2×5支/盒 含碘液和煌绿，2支添加于100mL(023030)中配成TTB。
3.4% FeCl3试剂(TDA配套试剂) 29240 10ml/支 用于色氨酸脱氨酶试验。
甘油 29080 2mL/支×10 每支添加于100mL(027050)、(027051)、(027052)或(027053)中。
蛋白质**结晶体染色液 29063 10mL 用于苏云金芽孢杆菌的蛋白质**结晶体的染色。
VP试剂 29050 10mL×2瓶 用于VP试验。
甲基红试剂 29040 10mL 用于甲基红试验。
靛基质试剂 29030 10mL 用于靛基质(吲哚)试验
芽孢染色液 29020 10mL×2瓶 用于**芽孢染色。
革兰氏染色液 29010 10mL×4种/盒 用于**革兰氏染色。
1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基配套试剂 SR0410 10支/盒 每支添加于1000mL的1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基（021105）中.
志贺氏菌增菌肉汤配套试剂 SR0380 10支/盒 每支添加于225mL的志贺氏菌增菌肉汤（023141）中。
改良MRS培养基配套试剂 （莫匹罗星锂盐+半胱氨酸盐酸盐） SR0370 2*5支/盒 每支添加于100mL的MRS琼脂培养基（027315）中
Bolton 肉汤冻干配套试剂 SR0340 10支/盒 每支添加于100mL的 Bolton 肉汤基础中。
Skirrow琼脂基础冻干配套试剂 SR0330 10支/盒 每支添加于100mL的 Skirrow琼脂基础中