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***检定培养基6号
(Antibiotic Agar No.6)
用 途:
***检定培养基6号用于黏菌素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。
***检定培养基6号原 理:
本法是利用***在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与***的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种微生物学方法。
配方(每升):
胨 8g
牛肉浸出粉 3g
氯化钠 45g
磷酸氢二钾 3.3g
葡萄糖 2.5g
酵母浸出粉 5g
磷酸二氢钾 1g
琼脂 15g
*终pH 7.3±0.1
***检定培养基6号 使用方法(计数用法):
1、称取***检定培养基6号82.8g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压**30min。
2、双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行,并注意避免微生物及***污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化,避免直火加热。
3、双碟的底层:用**大口20mL吸管或其它**分装器,吸取已融化的培养基20mL注入双碟内,待凝固后加入菌层。(双碟内的培养基应均匀的分布于平皿内。)
4、菌层:取出试验用菌悬液,按预试好的加菌量[能得清晰的抑菌圈位度。二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径在18~22mm,三剂量法标准品溶液的中心浓度所致的抑菌圈直径在15~18mm],用**吸管吸取菌悬液适量,加入已融化并保温在水浴中(水浴温度:**为48~50℃,芽孢可至60℃)的培养基内,摇匀,作为菌层培养基使用。取出加有底层培养基的双碟,用**大口5mL、10mL吸管或其他适宜分装器,吸取菌层培养基5mL,加于底层培养基上,使其均匀摊布,等凝固后放置钢管。
5、放置钢管:使用钢管放置器或小眼科镊子,使钢管平稳的落在培养基上,相应剂量的钢管 对角均匀放置。钢管放妥后,双碟静置5~10分钟后,再开始滴加***溶液。
6、滴加***溶液用**毛细滴管或微量加样器(调节加样量约为200-300μL),在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加标准品及供试品溶液顺序,因实验设计方法不同而异。(2.2)法,在双碟的4个钢管中分别成“Z”字形滴加标准品及供试品高、低两种浓度的溶液;在(3.3)法的6个钢管中间隔3个钢管中分别滴加标准品及供试品高、中、低3种浓度,并使相同浓度成对角。滴加溶液至钢管口平满。注意滴加时间溶液的间隔不可过长。
7、滴加完毕,用陶瓦盖覆盖双碟,平稳置于双碟托盘内,将双碟托盘水平平稳地移入培养箱中间位置,在35~37℃或该药品标准规定的温度下培养至所需时间。
8、抑菌圈测量:测量前应检查抑菌圈是否圆整,如有破圈或圈不圆整,应舍弃该碟。可用抑菌圈测量仪或游标卡尺测量。
***检定培养基6号 质量控制:
本品在**后应澄清无沉淀,下列菌株接种后35~37℃培养16~18h生长情况如下表:***检定培养基6号
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
锰盐营养琼脂 27120 250g 用于嗜温和嗜热需氧芽孢杆菌的检测酸性肉汤 27110 250g 用于酸性罐头食品商业无菌检验
溴甲酚紫葡萄糖肉汤 27100 250g 用于低酸性罐头食品商业无菌检验
***显色培养基 YB016 1000ml ***显色培养基用于***特别是白色***的选择性分离和初步鉴别。(2015版CP)
紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基 22223 250g 用于耐胆盐革兰氏阴性菌的选择性分离培养。(2015版CP)
溴化十六烷基**铵琼脂培养基 27043 250g 溴化十六烷基**铵琼脂培养基用于药品中铜绿假单胞菌的选择性分离培养。(2015版CP)
梭菌增菌培养基 27145 250g 用于梭菌的增菌培养。(2015版CP)
沙氏葡萄糖液体培养基 21096 250g 用于**和酵母菌的培养。 (2015版CP)
沙氏葡萄糖琼脂培养基 21099 250g 用于**和酵母菌的培养。 (2015版CP)
三糖铁琼脂培养基 22081 250g 用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应。 (2015版CP)
木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基(XLD) 29997 250g 用于药品中沙门氏菌的选择性分离培养。 (2015版CP)
玫瑰红钠琼脂培养基 21011 250g 供药品和生物制品中**和酵母菌的计数、分离和培养用。 (2015版CP)