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***检定培养基1号(高PH)
Antibiotic Agar No.1(high pH)
用 途:
***检定培养基1号(高pH)用于链霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。
***检定培养基1号(高PH) 原 理:
本法是利用***在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与***的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种微生物学方法。
配方(每升):
胨 5g
磷酸氢二钾 3g
牛肉浸出粉 3g
琼脂 15g
*终pH 7.9±0.1
***检定培养基1号(高PH)使用方法(管碟法):
1、称取 ***检定培养基1号(高pH)26g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压**30min。
2、双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行,并注意避免微生物及***污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化,避免直火加热。
3、双碟的底层:用**大口20mL吸管或其它**分装器,吸取已融化的培养基20mL注入双碟内,待凝固后加入菌层。(双碟内的培养基应均匀的分布于平皿内)。
4、菌层:取出试验用菌悬液,按预试好的加菌量(能得清晰的抑菌圈位度。二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径在18~22mm,三剂量法标准品溶液的中心浓度所致的抑菌圈直径在15~18mm),用**吸管吸取菌悬液适量,加入已融化并保温在水浴中(水浴温度:**为48~50℃,芽孢可至60℃)的培养基内,摇匀,作为菌层培养基使用。取出加有底层培养基的双碟,用**大口5mL、10mL吸管或其他适宜分装器,吸取菌层培养基5mL,加于底层培养基上,使其均匀摊布,等凝固后放置钢管。
5、放置钢管:使用钢管放置器或小眼科镊子,使钢管平稳的落在培养基上,相应剂量的钢管 对角均匀放置。钢管放妥后,双碟静置5~10分钟后,再开始滴加***溶液。
6、滴加***溶液用**毛细滴管或微量加样器(调节加样量约为200-300μL),在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加标准品及供试品溶液顺序,因实验设计方法不同而异。(2.2)法,在双碟的4个钢管中分别成“Z”字形滴加标准品及供试品高、低两种浓度的溶液;在(3.3)法的6个钢管中间隔3个钢管中分别滴加标准品及供试品高、中、低3种浓度,并使相同浓度成对角。滴加溶液至钢管口平满。注意滴加时间溶液的间隔不可过长。
7、滴加完毕,用陶瓦盖覆盖双碟,平稳置于双碟托盘内,双碟叠放不可超过3层,将双碟托盘水平平稳地移入培养箱中间位置,在35~37℃或该药品标准规定的温度下培养至所需时间。
8、抑菌圈测量:测量前应检查抑菌圈是否圆整,如有破圈或圈不圆整,应舍弃该碟。可用抑菌圈测量仪或游标卡尺测量。
***检定培养基1号(高PH) 9、结果计算:按照生物检定统计法(中华人民共和国药典2010版进行可靠性测验及效价计算。
质量控制:
本品在**后应澄清无沉淀,下列菌株接种后35~37℃培养14~16h生长情况如下表: ***检定培养基1号(高pH)
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
***检定培养基6号 22178 100g 用于黏菌素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。***检定培养基5号 22177 100g 供两性霉素B检定菌种啤酒酵母培养用(中华人民共和国药典2010版)。
***检定培养基3号 22175 100g 用于庆大霉素效价的微生物学检定及藤黄八叠球菌菌悬液制备(中华人民共和国药典2010版)。
***检定培养基2号(高pH) 22174 250g 用于磷霉素、大观霉素、新霉素、罗红霉素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)...
***检定培养基2号(低pH) 22173 250g 用于四环素、土霉素、金霉素、氯霉素、杆菌肽等的效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国经典...
***检定培养基1号(高pH) 22172 250g 用于链霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版...
***检定培养基1号(低pH) 22171 250g 用于磺苄西林等效价的微生物学检定
PH 7.0-氯化钠蛋白胨缓冲液 22116 250g 用于药品,生物制品的样品稀释。(《中华人民共和国药典》2010年版)
高盐察氏培养基 21030 250g 用于饲料中霉菌的检验(GB13092-91)。
氯化镁孔雀绿增菌液 23020 250g 用于食品和环境样本中沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外)的选择性增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.13,...
营养琼脂 22020 250g 用于**总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于**效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4...
MC培养基 27301 250g 用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T 4789.35-2010)。