产品名称：***检定培养基1号(低PH)

***检定培养基1号(低PH)

(Antibiotic Agar No.1)(low pH)

用 途：

***检定培养基1号(低pH)用于磺苄西林等效价的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。

***检定培养基1号(低PH) 原 理：

本法是利用***在琼脂培养基内的扩散作用，抑菌圈直径与***的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种微生物学方法。

配方(每升)：

胨 5g

磷酸二氢钾 3g

牛肉浸出粉 3g

琼脂 15g

*终pH 6.5±0.05

***检定培养基1号(低PH)使用方法(管碟法)：

1、称取***检定培养基1号(低pH)26g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压**30min。

2、双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行，并注意避免微生物及***污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化，避免直火加热。

3、双碟的底层：用**大口20mL吸管或其它**分装器，吸取已融化的培养基20mL注入双碟内，待凝固后加入菌层。(双碟内的培养基应均匀的分布于平皿内。)

4、菌层：取出试验用菌悬液，按预试好的加菌量[能得清晰的抑菌圈位度。二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径在18~22mm，三剂量法标准品溶液的中心浓度所致的抑菌圈直径在15~18mm]，用**吸管吸取菌悬液适量，加入已融化并保温在水浴中(水浴温度：**为48~50℃，芽孢可至60℃)的培养基内，摇匀，作为菌层培养基使用。取出加有底层培养基的双碟，用**大口5mL、10mL吸管或其他适宜分装器，吸取菌层培养基5mL，加于底层培养基上，使其均匀摊布，等凝固后放置钢管。

5、放置钢管：使用钢管放置器或小眼科镊子，使钢管平稳的落在培养基上，相应剂量的钢管 对角均匀放置。钢管放妥后，双碟静置5~10分钟后，再开始滴加***溶液。

6、滴加***溶液用**毛细滴管或微量加样器(调节加样量约为200-300μL)，在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加标准品及供试品溶液顺序，因实验设计方法不同而异。(2.2)法，在双碟的4个钢管中分别成“Z”字形滴加标准品及供试品高、低两种浓度的溶液;在(3.3)法的6个钢管中间隔3个钢管中分别滴加标准品及供试品高、中、低3种浓度，并使相同浓度成对角。滴加溶液至钢管口平满。注意滴加时间溶液的间隔不可过长。

7、滴加完毕，用陶瓦盖覆盖双碟，平稳置于双碟托盘内，双碟叠放不可超过3层，将双碟托盘水平平稳地移入培养箱中间位置，在35~37℃或该药品标准规定的温度下培养至所需时间。

8、抑菌圈测量：测量前应检查抑菌圈是否圆整，如有破圈或圈不圆整，应舍弃该碟。可用抑菌圈测量仪或游标卡尺测量。

9、结果计算：按照生物检定统计法(中华人民共和国药典2010版进行可靠性测验及效价计算。

质量控制：

本品在**后应澄清无沉淀，下列菌株接种后35~37℃培养14~16h生长情况如下表：***检定培养基1号(低pH)

贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

***检定培养基1号(低PH) 规 格：250g

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