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收到人主动脉内皮细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人主动脉内皮细胞内皮细胞构成了血管和其下组织的交界面。内皮细胞功能的变化是动脉粥样硬化的发病机理中的关键因素。内皮细胞能合成分泌凝血系统和纤溶系统中的活化因子和抑制因子,同时也能合成和分泌影响着血小板粘附和聚集的某些介质。内皮细胞还可以释放具有调控细胞增殖和血管壁张力功能的分子。人主动脉内皮细胞能生成诸如t-PA 和PAI-1等抗凝和血栓形成因子;在TNF-alpha的调节下,人主动脉内皮细胞能改变其生长特性,产生GM-CSF等细胞因子,在细胞表面表达ICAM-1,并产生大量的NO和内皮素。许多内皮水平的过程多可以通过内皮细胞的体外培养进行研究,因此,HAEC非常适用于研究和认识血管病变和衰老的分子机理。
人主动脉内皮细胞(HAEC)提取于人主动脉组织,原代冻存。每管含有细胞数>5×105 cells/ml,此细胞通过vWF/Factor VIII 和CD31 (P-CAM)**荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。细胞可以达到15倍增。
推荐培养基: (ECM, Cat. No. 1001)
Reference
[1] Elhadj, S. and Forsten, K. E. (2001) Chronic shear stress affects bovine aortic endothelial cell secreted proteoglycan production in vitro. Bioengineering Conference, Vol. 50:767-768.
[2] Donnini, D., Perrella, G., Stel, G., Ambesi-Impiombato, F. S., Curcio, F. (2000) A new model of human aortic endothelial cells in vitro. Biochimie 82:1107-14.
人主动脉内皮细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人主动脉内皮细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
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注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人主动脉内皮细胞其它细胞系展示表:
yb1872 mIFN-γ-ELISA 小鼠IFN-γELISA试剂盒 Mouse IFN-γ ELISA Kit 96 tests
yb1873 mIGF-1-ELISA 小鼠IGF-1ELISA试剂盒 Mouse IGF-1 ELISA Kit 96 tests
yb1874 mIGF-2-ELISA 小鼠IGF-2 ELISA试剂盒 Mouse IGF-2 ELISA Kit 96 tests
yb1875 mIGFBP-1-ELISA 小鼠IGFBP-1ELISA试剂盒 Mouse IGFBP-1 ELISA Kit 96 tests
yb1876 mIGFBP-3-ELISA 小鼠IGFBP-3ELISA试剂盒 Mouse IGFBP-3 ELISA Kit 96 tests
yb1877 mIL-1α-ELISA 小鼠IL-1αELISA试剂盒 Mouse IL-1α ELISA Kit 96 tests
yb1878 mIL-1α-ELISA 小鼠IL-1αELISA试剂盒 Mouse IL-1α ELISA Kit 96 tests
yb1879 mIL-2-ELISA 小鼠IL-2ELISA试剂盒 Mouse IL-2 ELISA Kit 96 tests
yb1880 m IL-3 -ELISA 小鼠IL-3ELISA试剂盒 Mouse IL-3 ELISA Kit 96 tests
yb1881 m IL-4-ELISA 小鼠IL-4 ELISA试剂盒 Mouse IL-4 ELISA Kit 96 tests
yb1882 m IL-5-ELISA 小鼠IL-5ELISA试剂盒 Mouse IL-5 ELISA Kit 96 tests
yb1883 m IL-6-ELISA 小鼠IL-6ELISA试剂盒 Mouse IL-6 ELISA Kit 96 tests
yb1884 mIL-10-ELISA 小鼠IL-10ELISA试剂盒 Mouse IL-10 ELISA Kit 96 tests
yb1885 mIL-12(p70)-ELISA 小鼠IL-12(p70)ELISA试剂盒 Mouse IL-12(p70) ELISA Kit 96 tests
yb1886 mIL-17-ELISA 小鼠IL-17ELISA试剂盒 Mouse IL-17 ELISA Kit 96 tests
yb1887 mLaminin-ELISA 小鼠层粘连蛋白ELISA试剂盒 Mouse Laminin ELISA Kit 96 tests
yb1888 mLeptin-ELISA 小鼠瘦蛋白ELISA试剂盒 Mouse Leptin ELISA Kit 96 tests
yb1889 mLeptinR-ELISA 小鼠瘦蛋白受体ELISA试剂盒 Mouse Leptin receptor ELISA Kit 96 tests
yb1890 mMCSF-ELISA 小鼠巨噬细胞集落刺激因子ELISA试剂盒 Mouse M-CSF ELISA Kit 96 tests
yb1891 mMMP-2-ELISA 小鼠MMP-2ELISA试剂盒 Mouse MMP-2 ELISA Kit 96 tests
yb1892 mMMP3-ELISA 小鼠MMP-3ELISA试剂盒 Mouse MMP-3 ELISA Kit 96 tests
yb1893 mMMP-9-ELISA 小鼠MMP-9ELISA试剂盒 Mouse MMP-9 ELISA Kit 96 tests