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收到人羊膜上皮细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人羊膜上皮细胞人羊膜是由上皮细胞层,基底膜和无血管基质组成。羊膜上皮细胞是在受精后的第8天由外胚层形成。由于其为胚胎来源,羊膜上皮细胞缺少主要的组织相容性抗原,这点已用于异基因移植来**病人的溶酶体**。研究表明,羊膜上皮细胞具有多种功能,例如:合成和释放乙酰胆碱和儿茶酚胺,同时,表达编码多巴胺受体和多巴胺转运蛋白的信使RNA。它们表达神经元和神经胶质细胞的标记物并形成基本的纤维母细胞生长因子,肝细胞生长因子和β转运生长因子。人类羊膜上皮细胞被认为是研究多巴胺释放和摄取过程、受体信号转导和开发作用于这些受体的新**的合适的人的细胞模型。
人羊膜上皮细胞(HAEpiC)提取于人羊膜组织,于原代冻存。每管含有细胞数>5×105 cells/ml,此细胞通过Cytokeratin-18, Cytokeratin-19和Vimentin**荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。
推荐培养基(KM, Cat. #2101)
Reference
[1] Sakuragawa, N., Elwan, M. A., Uchida, S., Fujii, T., Kawashima, K. (2001) Non-neuronal neurotransmitters and neurotrophic factors in amniotic epithelial cells: expression and function in humans and monkey. Jpn J Pharmacol. 85(1):20-3.
[2] Ishii, T., Ohsugi, K., Nakamura, S., Sato, K., Hashimoto, M., Mikoshiba, K., Sakuragawa, N. (1999) Gene expression of oligodendrocyte markers in human amniotic epithelial cells using neural cell-type-specific expression system. Neurosci Lett. 268(3):131-4.
[3] Elwan, M. A., Ishii, T., Sakuragawa, N. (2003) Characterization of the dopamine transporter gene expression and binding sites in cultured human amniotic epithelial cells. Neurosci Lett. 342(1-2):61-4.
人羊膜上皮细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人羊膜上皮细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人羊膜上皮细胞其它细胞系展示表:yb1098 人滑膜细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1099 人髓核细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1100 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1101 人骨骼肌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1102 人骨骼肌卫星细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1103 人骨骼肌成肌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1104 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1105 人口腔黏膜角化细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1106 人牙龈成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1107 人牙周膜成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1108 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1109 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1110 人毛**细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1111 人毛发基质细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1112 人毛囊外根鞘细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1113 人毛囊内根鞘细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1114 人乳腺表皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1115 人乳腺成纤维细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1116 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1117 人前列腺上皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1118 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1119 人间充质干细胞-骨髓 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1120 人间充质干细胞-脂肪 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1121 人间充质干细胞-肝 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1122 人间充质干细胞-脐带 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1123 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1124 人脐静脉内皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1125 人脐动脉内皮细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
yb1126 人脐静脉平滑肌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周