产品名称： 2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)

产品描述

2×Hieff^TM HotStart PCR Master Mix是即用型的PCR预混合溶液，含有HotStart DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。Mix中不含染料，其中的保护剂使得Mix经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)产品信息

2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。收到产品后放到-20 ºC保存。

活性定义  

用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物，在74ºC，30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)质量控制

核酸外切酶残留检测：20μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

核酸外内酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH₂O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

功能检测：50 μl体系中，以30 pg人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。35个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。

2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)应用实例

1.        反应体系配制（50μl）：

§ 针对不同模板的*佳反应浓度有所不同，下表为50μl反应体系推荐模板使用量，仅供参考。