产品详情
  • 产品名称: Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒

  • 产品型号:10126YB50
  • 产品厂商:YBscience
  • 产品价格:0
  • 折扣价格:0
  • 产品文档:
你添加了1件商品 查看购物车
简单介绍:
Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒动是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒,适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系,可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物, Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒也无需有机溶剂抽提,即可得到质量稳定的基因组DNA,无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小,少到5mg动物组织即可进行实验。
详情介绍:

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒

产品描述

动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒,适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系,可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物,也无需有机溶剂抽提,即可得到质量稳定的基因组DNA,无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小,少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性,能直接以待测样品裂解液为模板,进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物,包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分,并以dUTP替代了dTTP,另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG (Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前,利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物,UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响,从而保证扩增的特异性和准确性,防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测,并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。

*2 × Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTPdUTP替代了dTTP)、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒运输方法

冰袋(wet ice)运输。

保存方法

 本试剂盒的10126-ATissue Master Mix保存在-20,避免反复冻融。

 10126-BBuffer AL】在常温干燥条件下,可保存12个月,如需保存更长时间可置于4

 10126-CProtease】溶液具有独特配方,常温保存(25)可长期具有活性,在4保存,其活性和稳定性会更好,因此建议将其置于在4保存,请勿置于-20保存。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒注意事项

1)本试剂盒适用于常规PCR,请勿用于多重PCR鉴定;建议扩增片段在1kb以内。

2)注意实验用具的清洁以及实验的操作手法,避免样本间的交叉污染。

3)建议采用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。

4Buffer AL若低温保存,容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37水浴中预热10min,以溶解沉淀,混匀后再使用。

5)电泳检测时,切勿使用含有 SDS  Loading Buffer,否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。

6)建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板,阴性反应以ddH2O为模板,引物可采用以前成功扩增的引物。

7)为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒操作方法

1. 5-10mg动物材料,置于离心管中。尽量剪碎动物材料,以使之后的酶解反应容易进行。

2. 100μl Buffer AL并加入4μl Protease,涡旋混匀。

3. 向混合液中加入动物组织,涡旋混匀。

4. 65孵育10-30min,然后95处理5min

【注】:65孵育,一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解,可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解,残余的部分在后续离心步骤中可被除去。

5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min

6. 转移上清至新的离心管,4-20放置备用或直接用于PCR扩增。

【注】:用于后续PCR检测时,模板量占PCR体系的1-10%之间*佳,不能超过20%。如50μl PCR体系中,加入0.5-5μl 裂解液即可,但不能超过10μl

7. PCR反应体系配制*

按照下表配制PCR反应体系,配置好反应体系后,短暂涡旋充分混匀并瞬时离心,将所有试剂收集到管底。

ddH2O

Up to 20μl

2 × Tissue Master Mix

10μl

正向引物(10μM

0.5μl

反向引物(10μM

0.5μl

模板 DNA

xμl

*】: 配制的PCR反应体系可根据所需终体系(如50μl)按照该比例进行调整。

       通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时,可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。

8. PCR反应条件设置

此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化*佳的反应条件,包括退火温度,延伸时间等。

循环步骤

温度

时间

循环数

UNG酶处理

50

5min

1

灭活UNG&预变性

94

5min

1

变性

94

10sec

30-40循环

退火a

50-65

20sec

延伸b

72

30 sec/kb

彻底延伸

72

5min

1

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒【注】:a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置;

 

b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定,对于1kb以内的DNA片段,建议延长时间为30sec

标题:
内容:
联系人:
联系电话:
Email:
公司名称:
联系地址:
 
 
注:1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!
关于我们| 易展动态| 易展荣誉| 易展服务| 易家文化| 英才集结号| 社会责任| 联系我们

备案号:粤ICP备11010883号| 公安机关备案号:44040202000312| 版权问题及信息删除: 0756-2183556  QQ: 服务QQ

Copyright?2004-2017  珠海市金信桥网络科技有限公司 版权所有

行业网站百强奖牌 搜索营销*有价值奖 中小企业电子商务**服务商
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,易展仪表展览网对此不承担任何保证责任。

沪公网安备 31011702004360号

X
选择其他平台 >>
分享到