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DNA磷酸化试剂盒
产品及特点
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团),而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子 5′端的-OH基团和另一个DNA分子3′端的-OH基团进行连接,因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA之间的连接效率一般都比天然DNA彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA有2个端口可以连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA磷酸化产品能将DNA分子5′端的-OH基团磷酸化。其操作流程如下:
DNA磷酸化试剂盒它具有下列特点:
1. 可以快速把DNA 5′端的-OH基团变成-PO4基团,使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3. 处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
DNA磷酸化试剂盒使用及效果
将PCR胶回收片段或单链DNA片段与TPK缓冲液、ATP溶液(10 mM)、T4 多核苷酸激酶(10U/uL)混合,37℃反应30分钟,70℃热处理5分钟,灭活酶。即可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。
DNA磷酸化试剂盒91104A-100 Denhardt溶液A(同位素用),50× 100 mL 290
91104B-100 Denhardt溶液B(非同位素用),50× 100 mL 390
100604-1 鲑鱼精DNA溶液,10 mg/mL 1 mL 190
130908-1 鲱鱼精DNA溶液,10 mg/mL 1 mL 190
核酸扩增
131186-0.5 探针标记专用PCR Mix 0.5ml 290
70802-600 即用型PCR Mix 2.0 B(无染料) 600次 690
90805-600 即用型PCR Mix 3.0 100次 190
130986-1.5 即用型热启动PCR 试剂盒 1.5次 240
130985-100 免DNA提取PCR试剂盒 100次 990
101005-100 即用型易错PCR Mix 100次 890
131178-10 DNA Shuffling 试剂盒 10次 1990
90702-20 即用型长片段PCR Mix 20次 397
90708-1.5/9 即用型高保真PCR Mix 1.5 mL/9ml 190/990
130605-50 即用型多重PCR试剂盒 50次 1190
90408-100 即用型荧光定量PCR Mix 100次 390
60906-10/50 cDNA**链合成试剂盒(RT试剂盒) 10次/50次 197/797
130608-30 AMV cDNA**链合成试剂盒 30次 490
130911-25 miRNA cDNA **链合成试剂盒 25次 1590
131042-25 miRNA 荧光定量RT-PCR试剂盒 25次 1990
131005-30 cDNA**链合成试剂盒 30次 690
80206-50 两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 50次 997
130921-50 两管式RT-PCR试剂盒(AMV-Taq) 50次 1190
130922-50 单酶一管式 RT-PCR 试剂盒(Tth) 50次 1190
91202-50 双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 50次 990
130609-1 一步式RT-PCRmix 1ml 1590