首页 >>> 公司新闻 >

公司新闻

qPCR​试验无Ct值出现原因及解决方法

qPCR试验无Ct值出现原因及解决方法:

1、检测荧光信号的步骤有误:

一般染料法采用72℃延伸时采集,探针法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
2、引物或探针降解:

可通过PAGE电泳检测其完整性。
3、模板量不足:

对未知浓度的样品应从系列稀释样本的zui高浓度做起。
4、模板降解:

避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。
5、反应循环数不够:

一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环,但高于45个循环会增加过多的背景信号。