大鼠表皮调节素ELISA试剂盒实验操作步骤:
1、将各种试剂移至室温(18-25℃)平衡至少30分钟,按前述方法配制试剂,备用。
2、加样:分别设标准品孔、待测样本孔。每孔分别加标准品或待测样本100μL,轻轻晃动混匀,覆上板贴,37℃温育2小时
3、弃去液体,甩干,不用洗涤。
4、每孔加生物素标记抗体工作液100μL,覆上新的板贴,37℃温育1小时。
5、 弃去孔内液体,甩干,洗板3次。每次浸泡2分钟,200μL/每孔,甩干。
6、每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液100μL,覆上新的板贴,37℃温育1小时。
7、弃去孔内液体,甩干,洗板5次。每次浸泡2分钟,200μL/每孔,甩干。
8、 依序每孔加底物溶液90μL,37℃避光显色15-30分钟。
9、依序每孔加终止溶液50μL,终止反应。
10、 在反应终止后5分钟内用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。