人转甲状腺素蛋白ELISA试剂盒操作流程:
1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2、酶标板置4℃,包被过夜。
3、洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4、阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6、洗板,同(4)。
7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9、洗板,同(4)。
10、每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
12、分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
Sodium phytate;植酸钠ZFX (L28B6) Mouse mAb100 ul
Lauric acid;正十二烷酸/月桂酸SPARC Antibody100 ul
Vinblastine Sulfate;硫酸长春碱Bub1b (D32E8) Rabbit mAb100 ul
Oxalic acid/Ethanedioic acid;无水草酸LIN28B Antibody (Mouse Preferred)100 ul
Telmisartan;替米沙坦FoxM1 (D3F2B) Rabbit mAb (Flow Formulated)400 ul