产生组织切片非特异性染色
1、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是重要的一条；
2、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看；
3、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；
4、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免 疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；
5、DAB孵育时间过长或浓度过高；
6、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤为重要；
7、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。