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普通PCR与实时荧光定量PCR不同点归纳
普通
PCR
与实时荧光定量
PCR
二者的实验结果相同,都能说明生物体外的特殊
DNA
复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。但是二者也有以下不同之处。
1
、二者系统组成不同
荧光定量
PCR
仪比普通的
PCR
仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。
2
、二者原理不同
荧光定量
PCR
实时监测与
DNA
结合的荧光染料激发的荧光,普通
OCR
通过检测插入
DNA
中核算染料的量来测定
PCR
终产物量。
3
、二者反应要求不同
荧光定量
PCR
对扩增片段有较高的要求,一般为
100-300bp
,普通
PCR
可以扩增长点的片段。
4
、二者应用不同
荧光定量
PCR
主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,普通的
PCR
仪是做定性分析和扩增基因片段,定量
PCR
仪可以做普通
PCR
仪的工作,反之不行。
5
、二者测量成本不同
定量
PCR
仪价格较为昂贵,普通的基因扩增仪
(PCR
仪
)
只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。
实时荧光定量
PCR
技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品
Ct
值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
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