细胞培养的基本步骤：
1、原代培养：从供体内取出组织，经机械或消化分离成单个细胞或单一型细胞群，在无菌、适当温度和营养条件下，生存、生长和繁殖。简单步骤为：剪切组织-消化分离-扩增培养。
2、传代培养：当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用PBS清洗，加入胰蛋白酶消化，分离细胞，再按一定比例接种到新的培养瓶中。一般2～3d后应换一次生长液。
3、体内细胞培养：将瘤细胞悬液接种到动物体内，形成肿瘤，再从肿瘤中分离细胞，进行培养。
4、细胞冻存：将细胞悬液与冻存液按一定比例混合，装入冻存管，放入-80℃冰箱，若需长期保存需要再转移到液氮中。
5、细胞复苏：将冻存细胞从液氮中取出，迅速在37℃水浴中解冻，加入预热的含血清的培养基，离心，弃上清液，加入新的培养基，放入孵箱中，培养。冻存与细胞复苏需要遵循慢冻速溶的原则。