抗体(antibody):机体在抗原物质刺激下,由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免yi球蛋白。
抗体亲和力是指抗体与抗原表位或抗原决定簇之间的结合力,本质是一种非共价作用力,包含了对氨基酸之间的吸引力,氢键、疏水性作用力等。
抗体亲和力大小可以用亲和力常数KD (升/质量摩尔浓度)表示,计算公式为:
KD=[Ab•H]/([Ab][H])
其中[]表示摩尔浓度,Ab表示抗体,H表示半抗原,Ab•H表示抗体与半抗原的结合物。
亲和力常数KD越高,则抗体结合半抗原的能力越强。
抗体亲和力的强弱取决于抗体对位与所用抗原表位之间的配合程度,包括接触面积的大小、亲和程度以及带点基团与疏水基因的分布等。抗体亲和力体现了一个抗体分子和抗原分子或半抗原的一个决定簇起反应的能力。是评价抗体质量的重要指标,反应了抗体与相应抗原之间的结合力度。亲和力越高,抗体与相应的抗原之间的结合程度越高,对抗体的应用具有重要的指导作用。
生物膜干涉技术(BLI)是一种免标记技术,通过实时检测光干涉信号的变化来实现亲和力的检测,能够实现实时提供高通量的生物分子相互作用信息,具有高灵敏度、高检测通量及较低的样品要求等优点。它不仅可以用于早期的**和筛选以及晚期的临床试验,还可以用于**监控和质量监控。
BLI实验原理为:利用光学干涉原理,在Fortebio Octet仪器的生物传感器底端存在生物分子相容层,当一束可见光从光谱仪射出后,在传感器末端的光学膜层的两个界面会形成两束反射光谱,并形成一束干涉光谱。随着生物分子的结合或解离,形成的膜层厚度和密度也发生变化,生物膜厚度的变化导致干涉光波发生相位移动。利用Fortebio Octet仪器捕获干涉光谱,并通过这个位移值做出实时的反应监测图谱。
通过BLI技术可以进行相应的抗体表征、抗体与蛋白等不同分子的亲和力检测等服务,能够满足药wu**的多方面需求,在药wu筛选,医疗诊断,免yi学研究,抗体工程等领域都有着广泛应用。