蛋白提取：
1、 细胞样品在提取前需要使用PBS清洗两遍，以减少培养基对样品的干扰，悬浮细胞可500Xg低速离心后收集进行蛋白提取。贴壁细胞可在培养器皿中直接进行蛋白提取。蛋白提取前建议进行细胞计数，以确定提取中添加裂解液的比例，得到很佳提取效率。
2、 组织样品在提取前也需要用PBS清洗，一些含血量丰富的组织，建议使用红细胞裂解液去除红细胞，以避免血液中IgG对后续实验的影响。
3、为了防止蛋白降解、去磷酸化，各种蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂都是必须的。
4、 在提取蛋白的时候仅仅靠裂解液有时候也不能达到完全抽提的效果，有条件的话，可以对抽提悬液进行超声破碎处理；超声的时候，因为超声发热损伤蛋白，需要把要超声的样本放到冰水混合物里。
5、此外如果没有裂解buffer，可以用1×SDSloading buffer代替来抽提蛋白，其效果类似于SDS裂解液，不过抽提后的样本不能进行浓度测定。
6、 蛋白煮沸变性一般是95-100°C，5-10min，水浴锅煮沸时，可用带夹EP管防止EP管盖弹开，使水浴锅内的水进入而使样品废掉。