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ELISA测定“边缘效应”的排除
以前在使用
96
孔板的
ELISA
测定中,常发现有
“
边缘效应
”
,即外周孔显色较中心孔深,产生这种
“
边缘效应
”
的原因可能为
96
孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为bu良热导体,在实验室的常规
ELISA
测定中,将板从室温(通常在
25
℃
左右)置于
37
℃
温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如
37
℃
),就可以很容易地排除
“
边缘效应
”
,并且可提高测定的重复性。
总而言之,在临床
ELISA
测定中,要保证好的测定效果,可采用下述简单办法来确保温育条件,即尽量采用水浴,温育中让微孔板浮于水面上,或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒,放于温箱中,这样就会因为板条孔底部直接与
37
℃
水或湿布的接触,以及水浴箱或湿盒内的高温度,而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。
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