聚合酶链反应技术(Polymerase chain raction ,PCR)是一种在体外扩增特定DNA片段的方法,可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
1、模板DNA
来源比较广,几乎所有形式的DNA和RNA都能作为PCR反应的模板。
2、缓冲液
用于维持DNA聚合酶的活性和稳定性。
3、dNTP
四种dNTP是PCR原料,其比例和浓度与PCR密切相关。
4、TaqDNA聚合酶简称Taq酶
在1969年在美国黄石国家公园温泉中发现。Taq酶具有良好的热稳定性,在92.5℃、95℃和97.5℃的半衰期为120 min、40 min、5min;
5、其它成分
Mg2 能活化DNA聚合酶;二甲基亚砜有利于DNA的变性;TMAC可去除非特异扩增,促进PCR;甘油有利于DNA复性,不过并不是对所有的PCR都有利。