大多数原代贴壁细胞贴壁时间是6h到12h,细胞不贴壁有好多种原因的:
1、如果你用玻璃培养瓶培养的话,有可能你的瓶子没处理好;建议你用一次性培养瓶,进口的都可以。
2、一般做原代细胞贴壁培养用胰酶消化,消化的程度要掌握好,如果消化时间不到、分散不均匀不贴壁。一般消化有热消化,就是放在37度里消化,时间比较短不好控制,传代培养常用。还有就是冷消化放在4度里,一般在几个小时以上,胰酶浓度也有要求的,一般都用0.125-0.25%之间。ph在7.6左右。
3、还有就是天然培养基的选择,就是血清种类,血清能够使细胞贴壁,并且提供细胞生长的重要营养成分。