植物乳杆菌复苏步骤与注意事项:
一、材料:
1. 常规细胞培养仪器设备 恒温水浴振荡器。
2. 培养液(DMEM)胎牛血清(CBS)二甲基亚砜(DMSO)。
二、操作程序:
1. 细胞实验室进行常规消 毒,紫外照射40min以上。
2. 培养液(DMEM)、0.25%胰蛋白酶(Trypsin)恒温水浴箱370C预热20min,备用。
3. 二甲基亚砜(DMSO)在40C冰箱中冷藏30min,备用。
4. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入400C水浴中,快速摇晃,直至冻存液*融化。
5. 将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。
6. 用培养液悬液混悬沉淀细胞,调整细胞浓度,方培养箱中培养。
7. 记录复苏日期。