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ELISA试剂盒科学保存事项小结
酶联免 疫吸附试验(
ELISA
)
因其操作简单,灵敏度高,特异性好,经济安 全等特点而在临床上广泛应用,但是由于其操作步骤复杂,一般包括试剂准备,样本收集,加样,温育,洗涤,显色,比色,结果判定等,其中任何一项操作不当都会对检测结果产生很大影响。因此,必须加强
ELISA
检测的全 面 质量控制,保证其结果的准确可靠。ELISA试剂盒科学保存事项小结:
1
、
ELISA
试剂盒要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以
HRP
为标记酶的
ELISA
试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的
HRP
底物反应显色。
2
、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细 菌污染,一则细 菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细 菌的内源性酶如大肠杆菌的β
-
半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
3
、血清标本如是以无菌操作分离,则可以在
2
~
8
℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在
-70
℃以下。
4
、冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。
ELISA
试剂盒标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
5
、标本在保存中如出现细 菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
Elisa
试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免 疫学检验的各领域中。
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