实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在**上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
公司专业供应的抗体,产品仅用于科研是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称
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蛋白激酶A2抗体100ul
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英文名称
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Anti-AKAP2
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货号
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K210418
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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
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抗体的制备过程:
1. 原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量**时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经并添加防腐剂。
抗体的多样性:
抗体的异质性。抗体的组成极为复杂,是由成千上万、多种多样的球蛋白(Ig)分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上,既相似,又有差别。由于有差别,它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位(抗原结合簇),所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面,抗体本身是一种蛋白质,具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构,对异种动物来说,它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性,它们表现出不同的血清学类型。
一抗和二抗的区别:
抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体系统产生应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
组织相容性复合体蛋白1抗体英文全称Heli-cobactor pylori Cytotoxin associated gene A英文简称HP-CagA-IgG检测范围6244nmol/L-80ng/mL
组织相容性复合体蛋白2抗体英文全称UrogenⅢ英文简称Urogen Ⅲ检测范围6245nmol/L-40nmol/mL
跨膜结构域4亚家族成员2抗体英文全称B-cell leukemia/lymphoma 6,Bcl6英文简称Bcl6检测范围6246nmol/L-1600pg/mL
肌球蛋白轻链3抗体英文全称Vitellogenin2英文简称VTG2检测范围6247nmol/L-640ng/mL
间质细胞蛋白抗体英文全称ALVP27-Ab英文简称ALVP27-Ab检测范围6248nmol/L-
26S蛋白酶调节亚型7抗体英文全称IGHV英文简称IGHV检测范围6249nmol/L-20ug/ml
核基质蛋白3抗体英文全称thiol oxidase英文简称thiol oxidase检测范围6250nmol/L-800U/L
线粒体核糖体蛋白L11抗体英文全称aminopeptidase英文简称aminopeptidase检测范围6251nmol/L-200U/L
促血管平滑肌细胞分化因子抗体英文全称Collagen Type X英文简称Colx检测范围6252nmol/L-20ng/mL
染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体英文全称Glutathione S Transferase Alpha英文简称GSTa检测范围6253nmol/L-80ng/mL
基质金属蛋白酶9抗体英文全称Epoxide Hydrolase 1英文简称EPHX1检测范围6254nmol/L-20ng/mL
可溶性苹果酸脱氢酶抗体英文全称TCN1英文简称TCN1检测范围6255nmol/L-2000pg/mL
多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体英文全称Bone Morphogenetic Protein 6英文简称BMP6检测范围6256nmol/L-1000pg/mL
NADH复合体1抗体英文全称holotc英文简称holotc检测范围6257nmol/L-800pg/mL
E3泛素连接酶MUL1抗体英文全称Surfactant Protein A英文简称SP-A检测范围6258nmol/L-200pg/mL
肥大细胞类糜蛋白酶1抗体英文全称myogenic differentiation antigen 英文简称MDA检测范围6259nmol/L-4000pg/mL
蛋白激酶A2抗体100ulD-乳脱氢酶 进口、国产 英文名称:D-LDH 含量:BR,u/mg
D-色醇 进口、国产 英文名称:D-Tryptophanol 含量:BR,%
D-色甲酯盐盐 进口、国产 英文名称:D-Tryptophanmethylesterhydrochloride 含量:BR,%
D-山梨糖醇 进口、国产 英文名称:D-Sorbitol 含量:高纯,%
D-树胶糖 进口、国产 英文名称:D-(−)-Arabinose 含量:BR,mM
D-树胶糖醇 进口、国产 英文名称:D(+)-Arabitol 含量:高纯,%
D-丝甲酯盐盐 进口、国产 英文名称:D-Serinemethylesterhydrochloride 含量:BR,%
D-塔格糖 进口、国产 英文名称:D-(−)-Tagatose 含量:BR,牡蛎提取
D-天冬素 进口、国产 英文名称:D-AsparagineMonohydrate 含量:BR,%
D-天门冬二甲酯盐盐 进口、国产 英文名称:D-Asparticaciddimethylesterhydrochloride 含量:BR,%