实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在**上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
公司专业供应的抗体,产品仅用于科研是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称
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EBV Nuclear Antigen抗体
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英文名称
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Anti-EBV Nuclear Antigen
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货号
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K213678
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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
抗体的制备过程:
1. 原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量**时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经并添加防腐剂。
抗体的多样性:
抗体的异质性。抗体的组成极为复杂,是由成千上万、多种多样的球蛋白(Ig)分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上,既相似,又有差别。由于有差别,它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位(抗原结合簇),所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面,抗体本身是一种蛋白质,具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构,对异种动物来说,它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性,它们表现出不同的血清学类型。
一抗和二抗的区别:
抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体系统产生应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
泡盛曲霉仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
贝伦格葡萄座腔菌 Chaetomium torulosum
圆酵毛壳 Lentinula edodes
香菇仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
蕈状芽孢杆菌仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
细交链孢菌 Cryptococcus victoriae
无 Bacillus thermoamylovorans
热噬淀粉芽孢杆菌 Monascus ruber
红色红曲霉 Cyathus griseocarpus
浅被黑蛋巢仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
大豆慢生根瘤菌 Phanerochaetc chrysosporium
白腐菌 Corynebacterium glutamicum
谷氨棒杆菌 Escherichia coli
大肠埃希氏杆菌 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Bacillus subtilis
枯草芽孢杆菌 Streptomyces caespitosus
EBV Nuclear Antigen抗体Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG盐阿米洛利Human
Cy5标记的小鼠抗豚鼠IgG盐艾司洛尔Human
Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG盐Human, Mouse
Cy7标记的小鼠抗豚鼠IgG盐巴尼地平Human, Mouse
PE标记的小鼠抗豚鼠IgG盐贝那普利/苯那普利Human
PE-Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG盐贝尼地平Human, Mouse
罗丹明标记的小鼠抗豚鼠IgG盐地尔硫卓Human, Mouse
罗丹明标记的兔抗亲和素盐丁咯地尔Human, Mouse
FITC标记的兔抗亲和素盐多巴酚丁Human, Mouse