EBF1抗体

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单抗制备过程：

1.提取合成专一性抗体的单个B细胞（不能在体外生长）。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B细胞融合，得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，并进行克隆化培养，得到稳定的杂交瘤细胞，再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯，一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A－琼脂糖4B亲和层析法。
抗体的多样性：
抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。

抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
我司提供以下技术外包服务:

1.分子生物学：质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学：基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
2.蛋白工程：原核、哺乳动物蛋白表达系统等
3.病毒包装：腺病毒、慢病毒等
4.抗体工程：磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
5.细胞工程：细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
单抗原理：
抗体主要由B细胞合成。每个B细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B细胞系，含遗传基因不同的B细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个**一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。
土壤杆菌 Arthrobacter scleromae

硬结节杆菌 Bacillus  subtilis

枯草芽孢杆菌 Monilinia fructicola

美澳型核果褐腐病菌 Trichoderma virens

绿木霉 Polaromonas  sp.

单胞菌 Saccharomyces  cerevisiae

酿酒酵母 Aspergillus niger

黑曲霉 Bacillus methylotrophicus

营养型芽胞杆菌 Wolfiporia cocos

茯苓菌 Streptomyces cacaoi subsp. asoensis

可可链霉菌阿苏亚种 Edwardsiella tarda

爱德华氏菌属 Corynebacterium  glutamicum

谷氨棒杆菌Ⅰ型 Nonomuraea fuscirosea

棕粉色野野村氏菌 Cellulomonas  flavigena

产黄纤维单胞菌 Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum

解淀粉芽胞杆菌植物亚种 Brevibacterium  ammoniagenes
EBF1抗体c-erbB-2受体抗原瑞格列奈（标准品）Human, Mouse

c-erbB-4癌因抗原瑞舒伐他汀钙/罗苏伐他汀钙（标准品）Human, Mouse

囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原塞克硝唑（标准品）Human

CG6856-PA抗原塞来昔布，塞内昔布（标准品）Human

嗜铬粒素A抗原噻奈普汀;噻奈普汀(标准品)Human

嗜铬粒素B抗原三(羟)甘氨（标准品）Human

蕈型乙酰胆受体M1抗原三苯双脒（标准品）Human, Mouse

蕈型乙酰胆受体M3抗原三间苯三酚（1,3,5-三氧苯）（标准品）Human, Mouse

角蛋白18(多肽)三化钆六水合物Human, Mouse, Rat