脱乙基酶试剂盒

服务：

    我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

试剂配制:

1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。

2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注意事项：

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物请避光保存。

7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9． 本试剂不同批号组分不得混用。

操作步骤：

夹心法，一般的操作步骤为:

将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;

加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;

洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结;

洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结;

洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果;

间接法，一般的操作步骤为：

将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。

加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。

洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器测定塑胶盘中的吸光值，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

竞争法，其操作步骤为：

将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体

加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。