产品名称:肝癌细胞;SNU-387
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
培养条件:RPMI1640+10%FBS
传代方法:1:2传代
产品名称
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规格
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货号
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SNU-387细胞
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T25
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FS-X3267
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
肉碱 分析标准品,99%Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 人皮肤蛋白兔细丝蛋白Bβ(FLNβ)酶联吸附测定试剂盒
钙镁试剂 IndicatorHuman soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶性蛋白185兔血管活性肽酶抑制剂(VPI)酶联吸附测定试剂盒
3-苄 99%Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子兔血管内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)酶联吸附测定试剂盒
5--2- 99%Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 人T活化连接蛋白兔过氧化还原酶2(PRDX2)酶联吸附测定试剂盒
无水醋铜 99.99% metals basisHuman SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit 人SH2携带蛋白兔特异性β1糖蛋白(PSG1/SP1)酶联吸附测定试剂盒
无水化钴(Ⅱ) 99.7%Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 人B连接蛋白兔神经调节蛋白3(NRG-3)酶联吸附测定试剂盒
无水化铜(Ⅱ) 98%Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 人尿素酶相关蛋白C兔烯式酮羧激酶1(PCK1)酶联吸附测定试剂盒
无水化铜(Ⅱ) 99.99% metals basisHuman adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人衔接蛋白酶活化因子1兔胰岛素受体(INSR)酶联吸附测定试剂盒
柠康酐 98%Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit 人锚蛋白B兔组织蛋白酶K(CTSK)酶联吸附测定试剂盒
3-环己 99%Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 人潜伏膜蛋白1兔酪氨激酶2(Tyk-2)酶联吸附测定试剂盒
环己烯 97%Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit 人重组激活因2兔黑素瘤缺乏因子2(AIM2)酶联吸附测定试剂盒
环戊硫 97%Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit 人重组激活因1兔自噬因(BECN1)酶联吸附测定试剂盒
环辛酮 97%Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit 人NOD样受体兔β干扰素(IFN-β)酶联吸附测定试剂盒
胆固酯 98%Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 人视黄诱导因/RIG-1样受体兔嗜性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)酶联吸附测定试剂盒
2--6-氟 98%Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 人清道夫受体B兔骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)酶联吸附测定试剂盒
SNU-387细胞酪氨蛋白激酶受体A4Elisa试剂盒胶体金标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFV2 NADH脱氢酶黄素蛋白2抗体
低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体Elisa试剂盒Cy3标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFV1 NADH脱氢酶黄素蛋白1抗体
泛素结合酶E2Elisa试剂盒Cy5标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFS4 线粒体复合物NDUFS4蛋白抗体
N-肉豆蔻酰转移酶1Elisa试剂盒Cy5.5标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFS3 线粒体复合物NDUFS3蛋白抗体
D-脱氢酶Elisa试剂盒Cy7标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD) 线粒体复合物NDUFS1蛋白抗体
解整合素样金属蛋白酶15Elisa试剂盒PE标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFAF4 调节增值相关蛋白抗体
白介素10受体Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗小鼠IgG-FcNDUFA9 NDUFA9蛋白抗体
脂肪氧化酶Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗猴IgGNDUFA8 NADH脱氢酶α家族8抗体
蛋氨腺苷转移酶ⅡαElisa试剂盒FITC标记的兔抗猴IgGNDUFA10 NADH氧化还原酶辅酶10抗体
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