NKT细胞

冷冻保存细胞之方法？

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

产品名称：自然杀伤T细胞
来源：NK细胞

培养基：1640

状态：悬浮

培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情��，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

公司优势：

1.具有多年的销售经验的行业背景，我司秉承质量优先的理念，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；

2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系，还与国际接轨，我司代理多种知名的国际品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。

相关热销产品：

神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)elisa检测试剂盒英文名称：NAIP ELISA Kit，英文缩写：NAIP，产品别名：神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒，神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

热休克蛋白60(Hsp-60)elisa检测试剂盒英文名称：Hsp-60 ELISA Kit，英文缩写：Hsp-60，产品别名：热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA检测试剂盒，热休克蛋白60(Hsp-60)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

杀性/通透性增加蛋白(BPI)elisa检测试剂盒英文名称：BPI ELISA Kit，英文缩写：BPI，产品别名：杀性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA检测试剂盒，杀性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

鞘磷脂(SM)elisa检测试剂盒英文名称：SM ELISA Kit，英文缩写：SM，产品别名：鞘磷脂(SM)ELISA检测试剂盒，鞘磷脂(SM)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)elisa检测试剂盒英文名称：GKRP ELISA Kit，英文缩写：GKRP，产品别名：葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA检测试剂盒，葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

凝血因子Ⅷ(FⅧ)elisa检测试剂盒英文名称：FⅧ ELISA Kit，英文缩写：FⅧ，产品别名：凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA检测试剂盒，凝血因子Ⅷ(FⅧ)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

内质网蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)elisa检测试剂盒英文名称：ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit，英文缩写：ERP29/C12orf8/ERP28，产品别名：内质网蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)ELISA检测试剂盒，内质网蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)elisa检测试剂盒英文名称：ANX-Ⅰ ELISA Kit，英文缩写：ANX-Ⅰ，产品别名：膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)ELISA检测试剂盒，膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

卵泡抑素样蛋白1(FSTL-1)elisa检测试剂盒英文名称：FSTL-1 ELISA Kit，英文缩写：FSTL-1，产品别名：卵泡抑素样蛋白1(FSTL-1)ELISA检测试剂盒，卵泡抑素样蛋白1(FSTL-1)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)elisa检测试剂盒英文名称：PaCoA ELISA Kit，英文缩写：PaCoA，产品别名：磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA检测试剂盒，磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。

类白细胞抗原B27(HLA-B27)elisa检测试剂盒英文名称：HLA-B27 ELISA Kit，英文缩写：HLA-B27，产品别名：类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA检测试剂盒，类白细胞抗原B27(HLA-B27)检测试剂盒产品保存：2~8℃、有效期6个月。
NKT细胞Goat Anti-rat IgG/RBITC  罗丹明标记的羊抗大鼠IgG规格 0.3ml

Goat Anti-rat IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/PE  PE标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/HRP  辣根过氧化物酶标记的羊抗大鼠IgG规格 0.1ml
细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。