HONE-1细胞

实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

产品名称：鼻咽癌细胞
来源：鼻咽癌；男性

培养基：1640

状态：贴壁

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱���下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
苯酚磺基转移酶(PST)检测试剂盒英文名称：PST ELISA Kit22号染色体开放阅读框9抗体包装1g

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)检测试剂盒英文名称：SOD3 ELISA Kit肿瘤高表达周期相关蛋白抗体包装25g

半乳糖凝集素9(GAL9)检测试剂盒英文名称：GAL9 ELISA Kit9号染色体开放阅读框117抗体包装5g

半乳糖凝集素7(GAL7)检测试剂盒英文名称：GAL7 ELISA Kit6号染色体开放阅读框120抗体包装1g

半乳糖苷酶β(GLβ)检测试剂盒英文名称：GLβ ELISA Kit补体C1qα链多肽抗体包装25g

半乳糖苷酶α(GLα)检测试剂盒英文名称：GLα ELISA Kit补体C1qγ链多肽抗体包装5g

半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒英文名称：GAL8 ELISA Kit钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶抗体包装1g

半乳凝素6(GAL6)检测试剂盒英文名称：GAL6 ELISA Kit老年痴呆相关类钙粘蛋白CS2抗体包装5g

半乳凝素4(GAL4)检测试剂盒英文名称：GAL4 ELISA Kit质多聚腺苷酸结合蛋白3抗体包装1g

半乳凝素2(GAL2)检测试剂盒英文名称：GAL2 ELISA KitComplexin I/复合素1抗体包装5g

半乳凝素12(GAL12)检测试剂盒英文名称：GAL12 ELISA KitComplexin II/复合素2抗体包装1g

半胱氨酸丰富血管**诱导因子61(CYR61)检测试剂盒英文名称：CYR61 ELISA Kit转录调节因子C/EBPγ抗体包装25g

半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)检测试剂盒英文名称：CST3 ELISA Kit质连接蛋白2抗体包装5g

白细胞衍生趋化因子2(LECT2)检测试剂盒英文名称：LECT2 ELISA KitCD20抗体包装100g

白细胞衍生趋化因子1(LECT1)检测试剂盒英文名称：LECT1 ELISA Kit12号染色体开放阅读框40抗体包装500g
HONE-1细胞碗状瘤杯菌Human GABRA3 ELISA KitAlias: GABRA3ELISAKitReactivity: Human

Human GABRB1 ELISA KitAlias: GABRB1ELISAKitReactivity: Human

大肠埃希菌Human GABRD ELISA KitAlias: GABRDELISAKitReactivity: Human

无Human GABRG1 ELISA KitAlias: GABRG1ELISAKitReactivity: Human

嗜根考克氏菌Human GABRG2 ELISA KitAlias: GABRG2ELISAKitReactivity: Human

大豆慢生根瘤菌Human GADD34 ELISA KitAlias: GADD34ELISAKitReactivity: Human

枝状枝孢菌Human GAB3 ELISA KitAlias: GAB3ELISAKitReactivity: Human

南极印度站游动球菌Human GADD45A ELISA KitAlias: GADD45AELISAKitReactivity: Human
细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。