冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品名称
|
L-WRN细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
FS-X5353
|
产品名称:小鼠皮下结缔组织细胞
来源:皮下结缔组织;自发永生;雄性;C3H/An
培养基:1640
状态:贴壁
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业��景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
相关热销产品:
狼(狼大戟)(标准品)英文名称: Dacthal颗粒酶A抗体包装5g
狼(月腺大戟)(标准品)英文名称: 1-Chlorooctane颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体包装25g
狼乙素(标准品)英文名称: Dodecane粒-巨噬集落激因子3受体抗体包装5g
老鹳草素(标准品)英文名称: Bismuth solution血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体包装1g
老鹤草(标准品)英文名称: Copper solutionG蛋白修补结构域蛋白3抗体包装25g
老龙皮酸;网脊衣酸 A(标准品)英文名称: Copper solutionG蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体包装5g
老蛇莲(标准品)英文名称: Cobalt standard磷酸化珠蛋白转录因子1抗体包装250mg
酪(标准品)英文名称: Chromium StandardG蛋白偶联受体109A抗体包装1g
雷酚内酯(标准品)英文名称: Erbium standardG蛋白偶联受体15抗体包装5g
雷公藤春碱英文名称: Gold solution粒-巨噬集落激因子受体β抗体包装1g
雷公藤次碱(标准品)英文名称: Iridium standard solution生长停滞特异性蛋白8抗体包装5g
雷公藤定碱英文名称: Nickel standardG蛋白偶联受体GPR135蛋白抗体包装1g
雷公藤红素(标准品)英文名称: Potassium standard磷脂酰基蛋白聚糖-5抗体包装100g
雷公藤素(标准品)英文名称: Praseodymium standardGADD45γ相互作用蛋白1抗体包装25g
雷公藤晋碱英文名称: Tungsten solutionGTP结合蛋白4抗体(慢性肾功能衰竭蛋白)包装5g
L-WRN细胞纸葡萄穗霉Human VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA KitAlias: VASPELISAKitReactivity: Human
酿酒酵母Human TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA KitAlias: TRIM3|RINGfingerprotein97|Brain-expressedRINGfingerprotein|RINGfingerprotein22|BERP|RNF22|RNF97ELISAKitReactivity: Human
德氏乳杆菌保加利亚亚种Human TOP1(DNA topoisomerase 1) ELISA KitAlias: TOP1|DNAtopoisomeraseIELISAKitReactivity: Human
疣青霉Human PTPRF(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F) ELISA KitAlias: PTPRF|Leukocytecommonantigenrelated|LAR)ELISAKitReactivity: Human
中国平脐蠕孢Human AFM(Afamin) ELISA KitAlias: AFM|ALB2ALBAALFafaminALB2alpha-Alb|ALBAalpha-albumin|ALF|Alpha-Alb|Alpha-albuminELISAKitReactivity: Human
酿酒酵母Human ASS1(Argininosuccinate synthase) ELISA KitAlias: ASS1|Citrulline--aspartateligase|ASSELISAKitReactivity: Human
美澳型核果褐腐病菌Human RHOA(Transforming protein RhoA) ELISA KitAlias: RHOA|RhocDNAclone12|h12||ARH12|ARHAELISAKitReactivity: Human
大肠埃希菌Human ADC(Arginine decarboxylase) ELISA KitAlias: ADC|ODC-paralogue|ODC-p|Ornithinedecarboxylase-likeprotein|ARGDCELISAKitReactivity: Human
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报