冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品名称
|
EOL-1细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
FS-X5359
|
产品名称:急性髓系白血病细胞
来源:急性髓系白血病;男性
培养基:1640
状态:悬浮
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 ��钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业背景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
相关热销产品:
芦荟新甙D(标准品)英文名称: Molecular sieves, 3 Å鸟嘌呤核苷酸结合蛋白X抗体包装5g
芦笋(标准品)英文名称: Molecular sieves, 3 ÅGRAM结构域蛋白2抗体包装1g
芦竹根(标准品)英文名称: Molecular sieves, 3 Åγ-谷氨酰转移酶轻链2抗体包装250mg
芦竹碱(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 Å原钙粘蛋白γA1抗体包装5g
鲁斯考皂苷元(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 ÅG蛋白偶联受体70抗体包装1g
鹿角(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 ÅG蛋白偶联受体71抗体包装5g
鹿茸(马鹿)(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 Å谷氨酸受体δ2/GluR-δ2抗体包装25g
鹿茸(梅花鹿(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 Å血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体包装5g
鹿衔草(标准品)英文名称: Molecular sieves, 4 Å谷氨酸脱羧酶67抗体包装1g
路边青(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å生长抑制DNA损伤基因45抗体包装25g
路路通内酯(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å胃泌素抑制肽抗体包装5g
路路通酸(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å葡萄糖转运蛋白4抗体包装1g
绿包藤(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å磷脂酰基蛋白聚糖-3抗体包装5g
绿茶(茶叶)(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å糖皮质受体抗体包装1g
绿萍(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 Å胰高血糖素样肽-1抗体包装5g
EOL-1细胞阿尔及利亚拟盘多毛孢Human IK(Protein Red) ELISA KitAlias: IK|ProteinRER|CytokineIK|IKfactorELISAKitReactivity: Human
Human FCER1A(High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha) ELISA KitAlias: FCER1A|FCE1A|FcERI|Fc-epsilonRI-alpha|IgEFcreceptorsubunitalpha|ELISAKitReactivity: Human
孟氏假单胞菌Human BIN1(Myc box-dependent-interacting protein 1) ELISA KitAlias: BIN1|BridgingintegRator1|Box-dependentmyc-interactingprotein1|AmphiphysinII|Amphiphysin-likeprotein|ELISAKitReactivity: Human
新月弯孢霉Human FUT3(Galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase) ELISA KitAlias: FUT3|CD174|FT3B|FucT-III|Les|LewisFTELISAKitReactivity: Human
矮棒曲霉Human HSF4(Heat shock factor protein 4) ELISA KitAlias: HSF4|ATHSF4|AT-HSFB1|CTM|HSFB1|cataract|Marner|heatshockfactorprotein4|heatshocktranscriptionfactor4CTM|hHSF4|HSF4|HSTF4ELISAKitReactivity: Human
栗疫菌Human HEXB(Beta-hexosaminidase subunit beta) ELISA KitAlias: HEXB|ENC-1AS|N-acetyl-beta-glucosaminidasesubunitbeta|Beta-N-acetylhexosaminidasesubunitbeta(HexosaminidasesubunitB)|Cervicalcancerproto-oncogene7protein(HCC-7)|ENC-1AS|HCC-7|HEL-248|beta-hexosaminidasesubunitbeta|Beta-N-acetylhexosaminidasesubunitbeta|Cervicalcancerproto-oncogene7protein|hexosaminidaseB(betapolypeptide)|HexosaminidasesubunitB|N-acetyl-beta-glucosaminidasesubunitbetaELISAKitReactivity: Human
丁香链霉菌Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) ELISA KitAlias: TNFRSF10B|CD262|DR5|CD262antigen|deathdomaincontainingreceptorforTRAIL|Apo-2L|Deathreceptor5|DR5TRICK2B|Fas-likeprotein|KILLER|DR5|KILLERapoptosisinducingproteinTRICK2A|2B|TNF-relatedapoptosis-inducingligandreceptor2|TRAILreceptor2|TRAIL-R2apoptosisinducingreceptorTRAIL-R2|TRAILR2cytotoxicTRAILreceptor-2|TRICK2|TRICK2A|TRICKB|tumornecrosisfactorreceptorsuperfamilymember10B|tumornecrosisfactorreceptorsuperfamily|member10b|tumornecrosisfactorreceptor-likeproteinZTNFR9|ZTNFR9ELISAKitReactivity: Human
大肠埃希氏菌Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) ELISA KitAlias: PLA2G2A|Mom1|PLA2B|PLA2L|RASF-A|GIICsPLA2|GroupIIAphospholipaseA2|MOM1|Non-pancreaticsecretoryphospholipaseA2|NPS-PLA2|Phosphatidylcholine2-acylhydrolase2A|phospholipaseA2|groupIIA(platelets|synovialfluid)|phospholipaseA2|membraneassociated|PLA2BPLA2|PLA2LPLA2S|PLAS1|RASF-A|sPLA2ELISAKitReactivity: Human
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。