实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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PAE-EGFR细胞
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详见说明书
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FS-X5415
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产品名称：转EGFR受体的猪动脉内皮细胞
来源：BSL-1
培养基：DMEM：F12(1:1)90%，胎牛血清10%（1524/1534）
状态：上皮细胞
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使��自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
伊贝母(新疆贝母)（标准品）英文名称： D-Methionine人乙型肝炎核心抗原单克隆抗体包装25g
乙酰丁香酚英文名称： Sofosbuvir (GS-7977)磷酸化热休克蛋白27抗体包装5g
乙酰杠柳寡糖C英文名称： D-Ornithine monohydrochloride聚组氨酸抗体g标签抗体（C端）包装25g
乙酰哈巴苷(标准品)英文名称： H-D-Phe-OtBu.HCI磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体包装5g
乙酰化白藜芦(标准品)英文名称： D-ProlineHER2受体抗体包装1g
乙酰黄芪皂苷I英文名称： Cefathiamidine环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4包装25g
乙酰升麻-3-O-α-L-阿拉伯糖苷英文名称： H-D-Ser-OHHEAT重复内含蛋白8蛋白抗体包装5g
乙酰紫草素英文名称： D-Serine methyl ester hydrochloride 雄调节样蛋白抗体包装1g
乙酰紫堇灵（标准品）英文名称： H-D-Thr-OH雄调节蛋白2抗体包装5g
异阿魏酸（标准品）英文名称： D-Tryptophan methyl ester hydrochloride角化蛋白S100A18抗体包装250mg
异贝壳杉烯酸英文名称： N-Acetyl-D-tryptophan 型肝炎病NS4B抗体包装25g
异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素(标准品)英文名称： H-D-Tyr-OMe·HCl异质性核糖核蛋白C1/C2抗体包装5g
异补骨脂二氢黄酮（标准品）英文名称： 2'-O-Methyladenosine异质性核糖核蛋白R包装5g
异补骨脂色烯查耳酮英文名称： D-Valine同源相互作用蛋白激酶4抗体包装1g
异补骨脂素(标准品)英文名称： 2'-Deoxy-3'-guanylic acid disodium salt肝素辅助因子II抗体包装5g
PAE-EGFR细胞马赛菌Human MXD1(Max dimerization protein 1) ELISA KitAlias: MXD1|Maxdimerizationprotein1|Maxdimerizer1|ProteinMAD|BHLHC58|MADELISAKitReactivity: Human
坚强芽孢杆菌Human MNDA(Myeloid cell nuclear differentiation antigen) ELISA KitAlias: MNDA|MyeloidcellnucleardifferentiationantigenELISAKitReactivity: Human
拟雷氏日归壳Human ORM2(Alpha-1-acid glycoprotein 2) ELISA KitAlias: ORM2(Orosomucoid2)|Alpha-1-acidglycoprotein2|AGP2|Orosomucoid-2|OMD2ELISAKitReactivity: Human
阴沟肠杆菌Human SPN(Leukosialin) ELISA KitAlias: SPN|CD43|Leukosialin|GPL115|LSN|Ly-48|Sialophorin|CD43antigen|Galactoglycoprotein|GALGP|LeukocytesialoglycoproteinELISAKitReactivity: Human
肠膜明串珠菌Human Opi(Opiorphin) ELISA KitAlias: Opi|OpiorphinELISAKitReactivity: Human
圆弧青霉Human PLSCR1(Phospholipid scramblase 1) ELISA KitAlias: PLSCR1(PhospholipidScramblase1)|MMTRA1B|Erythrocytephospholipidscramblase|MmTRA1b|MMTRA1BCa(2+)-dependentphospholipidscramblase1|PLscramblase1ELISAKitReactivity: Human
杂色曲霉Human GLT25D1(Procollagen galactosyltransferase 1) ELISA KitAlias: GLT25D1|Procollagengalactosyltransferase1|Hydroxylysinegalactosyltransferase1|Glycosyltransferase25familymember1ELISAKitReactivity: Human
蜡状芽孢杆菌Human LDHD(Probable D-lactate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KitAlias: LDHD|ProbableD-lactatedehydrogenase|mitochondrial|DLD|LactatedehydrogenaseDELISAKitReactivity: Human
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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