实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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PAE-EGFR细胞
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详见说明书
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FS-X5415
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产品名称：转EGFR受体的猪动脉内皮细胞
来源：BSL-1
培养基：DMEM：F12(1:1)90%，胎牛血清10%（1524/1534）
状态：上皮细胞
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
伊贝母(新疆贝母)（标准品）英文名称： D-Methionine人乙型肝炎核心抗原单克隆抗体包装25g
乙酰丁香酚英文名称： Sofosbuvir (GS-7977)磷酸化热休克蛋白27抗体包装5g
乙酰杠柳寡糖C英文名称： D-Ornithine monohydrochloride聚组氨酸抗体g标签抗体（C端）包装25g
乙酰哈巴苷(标准品)英文名称： H-D-Phe-OtBu.HCI磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体包装5g
乙酰化白藜芦(标准品)英文名称： D-ProlineHER2受体抗体包装1g
乙酰黄芪皂苷I英文名称： Cefathiamidine环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4包装25g
乙酰升麻-3-O-α-L-阿拉伯糖苷英文名称： H-D-Ser-OHHEAT重复内含蛋白8蛋白抗体包装5g
乙酰紫草素英文名称： D-Serine methyl ester hydrochloride 雄调节样蛋白抗体包装1g
乙酰紫堇灵（标准品）英文名称： H-D-Thr-OH雄调节蛋白2抗体包装5g
异阿魏酸（标准品）英文名称： D-Tryptophan methyl ester hydrochloride角化蛋白S100A18抗体包装250mg
异贝壳杉烯酸英文名称： N-Acetyl-D-tryptophan 型肝炎病NS4B抗体包装25g
异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素(标准品)英文名称： H-D-Tyr-OMe·HCl异质性核糖核蛋白C1/C2抗体包装5g
异补骨脂二氢黄酮（标准品）英文名称： 2'-O-Methyladenosine异质性核糖核蛋白R包装5g
异补骨脂色烯查耳酮英文名称： D-Valine同源相互作用蛋白激酶4抗体包装1g
异补骨脂素(标准品)英文名称： 2'-Deoxy-3'-guanylic acid disodium salt肝素辅助因子II抗体包装5g
PAE-EGFR细胞马赛菌Human MXD1(Max dimerization protein 1) ELISA KitAlias: MXD1|Maxdimerizationprotein1|Maxdimerizer1|ProteinMAD|BHLHC58|MADELISAKitReactivity: Human
坚强芽孢杆菌Human MNDA(Myeloid cell nuclear differentiation antigen) ELISA KitAlias: MNDA|MyeloidcellnucleardifferentiationantigenELISAKitReactivity: Human
拟雷氏日归壳Human ORM2(Alpha-1-acid glycoprotein 2) ELISA KitAlias: ORM2(Orosomucoid2)|Alpha-1-acidglycoprotein2|AGP2|Orosomucoid-2|OMD2ELISAKitReactivity: Human
阴沟肠杆菌Human SPN(Leukosialin) ELISA KitAlias: SPN|CD43|Leukosialin|GPL115|LSN|Ly-48|Sialophorin|CD43antigen|Galactoglycoprotein|GALGP|LeukocytesialoglycoproteinELISAKitReactivity: Human
肠膜明串珠菌Human Opi(Opiorphin) ELISA KitAlias: Opi|OpiorphinELISAKitReactivity: Human
圆弧青霉Human PLSCR1(Phospholipid scramblase 1) ELISA KitAlias: PLSCR1(PhospholipidScramblase1)|MMTRA1B|Erythrocytephospholipidscramblase|MmTRA1b|MMTRA1BCa(2+)-dependentphospholipidscramblase1|PLscramblase1ELISAKitReactivity: Human
杂色曲霉Human GLT25D1(Procollagen galactosyltransferase 1) ELISA KitAlias: GLT25D1|Procollagengalactosyltransferase1|Hydroxylysinegalactosyltransferase1|Glycosyltransferase25familymember1ELISAKitReactivity: Human
蜡状芽孢杆菌Human LDHD(Probable D-lactate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KitAlias: LDHD|ProbableD-lactatedehydrogenase|mitochondrial|DLD|LactatedehydrogenaseDELISAKitReactivity: Human
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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