实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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H9/HTLV-IIIB细胞
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详见说明书
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FS-X5438
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产品名称：T**瘤白血病细胞
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
4-基伞形酮-β-D-木糖苷英文名称： N-Acetylglycine小鼠抗聚组氨酸单克隆抗体包装5g
4-羟基喹唑啉英文名称： Ac-Ala-OH铁调节蛋白/铁调素抗体包装1g
4-硝基儿茶酚(标准品)英文名称： N-Acetyl-D-alanine热休克蛋白J1抗体包装5g
4’-O-基补骨脂查尔酮B英文名称： N-Acetyl-L-Glutamine发状分裂相关增强子-5抗体包装25g
4β-羟基黄芪紫檀烷苷(标准品)英文名称： N-Acetyl-L-Tyrosine磷酸化热休克蛋白90α抗体包装5g
5,7,4'-三羟基-8-基二氢黄酮(标准品)英文名称： Methyl orange磷酸化组蛋白H2AX抗体包装100g
5,7-二羟基色原酮英文名称： Disperse Orange 13磷酸化组蛋白H3抗体包装25g
5-O-基维斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-...英文名称： Acid Orange 74磷酸化组蛋白H3抗体包装5g
5-O-基维斯阿米苷（标准品）英文名称： Crocein Orange G磷酸化组蛋白H3抗体包装5g
5-羟基糠（标准品）英文名称： Isatin组蛋白去乙酰化酶5抗体包装100g
5-羟色酸（标准品）英文名称： Nebivolol hydrochlorideA型流感病H5N1凝集素包装25g
5-羟色盐酸盐（标准品）英文名称： Nebivolol hydrochloride人巨病UL49蛋白抗体包装500g
6'''-阿魏酰斯皮诺素英文名称： Nuclear fast red肝核因子1β/HNF-1β抗体包装1g
6''-O-二酰基染料木苷英文名称： CarmineHHLA3蛋白抗体包装25g
6''-二酸沙苑子苷单酯英文名称： Bromophenol redHHIP样蛋白2抗体包装5g
H9/HTLV-IIIB细胞芽孢杆菌Human CFL1(Cofilin-1) ELISA KitAlias: CFL1(Cofilin1|Non-Muscle)|Cofilin-1|18kDaphosphoprotein|p18|Cofilin|non-muscleisoformELISAKitReactivity: Human
葡萄座腔菌Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA KitAlias: LGALS3BP|Galectin-3-bindingprotein|Tumor-associatedantigen90K|Mac-2-bindingprotein|MAC2BP|Mac-2BP|Basementmembraneautoantigenp105|Lectingalactoside-bindingsoluble3-bindingprotein|M2BPELISAKitReactivity: Human
稻生黄单胞菌*Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA KitAlias: CFLAR|CASP8andFADD-likeapoptosisregulator|InhibitorofFLICE|I-FLICE|FADD-likeantiapoptoticmolecule1|FLAME-1|CellularFLICE-likeinhibitoryprotein|c-FLIP|Caspase-likeapoptosisregulatoryprotein|CLARP|Usurpin|MACH-relatedinduceroftoxicity|MRIT|Caspasehomolog|CASH|Caspase-eight-relatedprotein|Casper|CASP8AP1ELISAKitReactivity: Human
果生链核盘菌Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA KitAlias: ADCYAP1R1|Pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptidetypeIreceptor|PACAPtypeIreceptor|PACAP-R-1|PACAP-R1|PAC1|PAC1R|PACAPR|PACAPRIELISAKitReactivity: Human
酿酒酵母Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA KitAlias: PPA1|Inorganicpyrophosphatase|Pyrophosphatephospho-hydrolase|PPase|IOPPP|PP|PP1|inorganicdiphosphatase|cytosolicinorganicpyrophosphataseELISAKitReactivity: Human
竹针孢座囊菌Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA KitAlias: RET|Proto-oncogenetyrosine-proteinkinasereceptorRet|Cadherinfamilymember12|Proto-oncogenec-Ret|Hirschsprungdisease1|multipleendocrineneoplasiaandmedullarythyroidcarcinoma1|retproto-oncogene|RETtransformingsequence|CDHR16|MEN2A|MEN2B|CDHF12|CDHR16|PTC|RET51ELISAKitReactivity: Human
局限青霉Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA KitAlias: CASR|Extracellularcalcium-sensingreceptor|CaSR|PaRathyroidcellcalcium-sensingreceptor|PCaR1|GPRC2A|CAR|EIG8|FHH|FIH|HHC|HHC1|NSHPTELISAKitReactivity: Human
新疆纤细芽孢杆菌Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA KitAlias: VIPR2|Vasoactiveintestinalpolypeptidereceptor2|VIP-R-2|VPAC2|Helodermin-preferringVIPreceptor|Pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptidetypeIIIreceptor|PACAPtypeIIIreceptor|PACAP-R-3|PACAP-R3|VIP2RELISAKitReactivity: Human
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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