冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品名称
|
ProPakA.6细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
FS-X5489
|
产品名称:胚肾细胞
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀���
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业背景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
相关热销产品:
谷胱甘肽(氧化型)标准品英文名称: VX-11e磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体包装25g
谷精草(标准品)英文名称: Alogliptin(SYR-322)酮抗体包装5g
骨碎补(标准品)英文名称: Curcumenol激肽释放酶7抗体包装1g
固公果根(标准品)英文名称: BYL-719激肽释放酶9抗体(舒血管素9)包装5g
瓜蒌(栝楼)(标准品)英文名称: BYL-719激肽释放酶14抗体包装1g
瓜蒌皮(双边栝楼(标准品)英文名称: A66电压阀门通道混合器相关亚家族成员7抗体包装5mg
瓜蒌皮(栝楼)(标准品)英文名称: SC514ATP敏感性通道亚基kir6.2抗体包装100ml
瓜子金(标准品)英文名称: γ-CyclodextrinTIP60抗体包装25g
瓜子金皂苷V英文名称: Me-β-CD组蛋白赖氨酸特异性脱基酶1抗体包装5g
瓜子金皂苷XXXI(对照品)英文名称: Epothilone B(EPO906, Patupilone) 转录因子GATA3结合蛋白G3B抗体包装1g
瓜子金皂苷己(标准品)英文名称: BMS345541磷酸化周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体包装5g
关白附(标准品)英文名称: IKK16磷酸化通道蛋白DRK1抗体包装25g
关黄柏(标准品)英文名称: Trelagliptin succinate;SYR-472离子通道蛋白Kv3.4抗体包装5g
管花苷A(标准品)英文名称: 2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 离子通道蛋白Kv3.3抗体包装1g
贯叶金丝桃(标准品)英文名称: 2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 组蛋白去基化酶JMJD2B抗体包装5g
ProPakA.6细胞噬尼古丁节杆菌Human SCARB2 (Lysosome membrane protein 2) ELISA KITAlias: SCARB2ELISAKitReactivity: Human
直立枝孢Human SFMBT1 (Scm-like with four MBT domains protein 1) ELISA KITAlias: SFMBT1ELISAKitReactivity: Human
酿酒酵母Human RRNAD1 (Protein RRNAD1) ELISA KITAlias: RRNAD1ELISAKitReactivity: Human
柴油食烷菌Human SESTD1 (SEC14 domain and spectrin repeat-containing protein 1) ELISA KITAlias: SESTD1ELISAKitReactivity: Human
蕈状芽孢杆菌Human SECISBP2L (Selenocysteine insertion sequence-binding protein 2-like) ELISA KITAlias: SECISBP2LELISAKitReactivity: Human
茫崖诺卡氏菌Human RMI2 (RecQ-mediated genome instability protein 2) ELISA KITAlias: RMI2ELISAKitReactivity: Human
泡盛曲霉Human S100PBP (S100P-binding protein) ELISA KITAlias: S100PBPELISAKitReactivity: Human
假芽胞杆菌属Human MSRB1 (Methionine-R-sulfoxide reductase B1) ELISA KITAlias: HSPC270| MSRB1| Selenoprotein X|SELR| SELX| SEPX1ELISAKitReactivity: Human
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。