WU多瘤病毒检测试剂盒

操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

产品特点：

1、公司产品仅用于科研不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3～5μg mtDNA。

注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。

产品组成:

使用方法:

一:培养细胞预处理

1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。

2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。

二:组织细胞预处理

3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小*),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。

三:血液预处理

4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。

5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)四:mtDNA提取

5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。

6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。

7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。

9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。

10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。

11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。

13. 重复上步1次。

14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。

15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。

16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。

18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。

19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。下列是公司正热销的产品：
通用型副伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR扩增检测试剂盒20次小鼠凋亡相关因子配体elisa检测试剂盒品牌

组织副伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR扩增检测试剂盒20次小鼠白介素18elisa检测试剂盒多少钱

体液副伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR扩增检测试剂盒20次小鼠白介素9elisa检测试剂盒说明书

粪便副伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR扩增检测试剂盒20次小鼠结缔组织生长因子elisa检测试剂盒

环境伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR扩增检测试剂盒20次小鼠白三烯B4elisa检测试剂盒多少钱

副伤寒沙门氏菌B（Salmonella Paratyphi B）标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次大鼠甲基化酶elisa检测试剂盒哪里有买

名称规格小鼠硫氧化还原蛋白elisa检测试剂盒说明书

通用型禽流感（avian influenza；AI）基因检测试剂盒20次小鼠载脂蛋白Eelisa检测试剂盒说明书

通用型禽鼻气管炎和肿头综合征（TRT）基因检测试剂盒20次小鼠骨成型蛋白4elisa检测试剂盒说明书

通用型禽鼻气管炎（ART）基因检测试剂盒20次小鼠苗条素受体elisa检测试剂盒哪里有买

通用型禽流感H5N1基因检测试剂盒20次大鼠αL岩藻糖苷酶elisa检测试剂盒哪里有买

通用型禽脑脊髓炎（Avian Encephalomyelitis；AE）20次大鼠血浆α颗粒膜蛋白elisa检测试剂盒

基因检测试剂盒大鼠内皮脂肪酶elisa检测试剂盒多少钱

通用型禽鼻气管炎鸟杆菌（Ornithobacterium rhinotracheale；ORT）20次大鼠组elisa检测试剂盒哪里有买

基因检测试剂盒大鼠前列腺素Felisa检测试剂盒说明书
WU多瘤病毒检测试剂盒Phospho-HER2(Tyr1221/1222)/FITC  荧光素标记磷酸化HER2受体抗体IgG异丁 Standard for GC,>99%(GC)

Phospho-HER2(Tyr1112) /FITC  荧光素标记磷酸化HER2受体抗体IgG5-壬酮 98%

Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC  荧光素标记磷酸化HER2受体抗体IgG2-壬酮 99%

Phospho-HER2 (Tyr877)/FITC  荧光素标记磷酸化HER2受体抗体IgG2-辛酮 98%

HER3/ErbB3 /FITC  荧光素标记HER3受体抗体IgG仲戊 standard for GC, ≥99.5% (GC)

HER3/ErbB3/PE  荧光素PE标记HER3受体抗体IgG仲戊 98%

HERG/FITC   荧光素标记特异性离子通道蛋白抗体IgG2-戊酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)

HEV/FITC  荧光素标记戊型肝炎病抗体IgG2-戊酮 99%

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